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K7M2 wt-Luc
Tissue
Ascite
Disease
Ostéosarcome chez la souris
Metastatic site
Poumon
Synonyms
K7M2-WT, K7M2

Documents

K7M2 wt-Luc

Cell line · Product number 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

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  • CoA
1

01General information

Description

La lignée K7M2 wt-Luc est un dérivé bioluminescent de la lignée cellulaire murine d’ostéosarcome K7M2, modifiée génétiquement pour exprimer de manière stable un gène rapporteur codant pour la luciférase de luciole. La lignée cellulaire parentale K7M2 a été établie à partir de l’ascite d’un ostéosarcome spontané chez une souris BALB/c; elle se caractérise par une morphologie ostéoblastique et un fort potentiel métastatique, en particulier vers les poumons. K7M2 est l’un des rares modèles syngéniques d’ostéosarcome disponibles chez la souche BALB/c, ce qui en fait un outil précieux pour l’étude de la biologie de l’ostéosarcome, des interactions entre la tumeur et le système immunitaire, ainsi que pour l’évaluation des stratégies d’immunothérapie chez un hôte immunocompétent.

L’intégration stable de la luciférase dans la lignée K7M2 wt-Luc permet une imagerie par bioluminescence (IBL) sensible et non invasive de la croissance de la tumeur primaire et de la propagation métastatique pulmonaire chez des souris syngéniques de souche BALB/c. Après l’administration du substrat luciférine, le signal émis est en corrélation avec le nombre de cellules tumorales viables, ce qui permet un suivi longitudinal de la prise de greffe tumorale, de la colonisation métastatique et de la réponse thérapeutique sans recourir à des procédures invasives à chaque point de mesure. Cela rend la souche K7M2 wt-Luc particulièrement adaptée aux études précliniques évaluant des agents antitumoraux et antimétastatiques, des inhibiteurs de points de contrôle et des stratégies de traitement combiné dans l’ostéosarcome.

La lignée K7M2 wt-Luc conserve les propriétés biologiques et immunologiques de la lignée parentale K7M2, y compris l’expression du composant C3 du complément et du récepteur Fc gamma I (FcgRI), caractéristiques susceptibles d’influencer les interactions avec le système immunitaire inné. Le rapporteur luciférase améliore considérablement la souplesse expérimentale et la sensibilité pour le suivi en temps réel de la progression tumorale. Les chercheurs doivent valider l’activité de la luciférase, la cinétique de croissance et le comportement métastatique dans leurs conditions expérimentales spécifiques avant toute utilisation in vivo à grande échelle.

Tissue
Ascite
Disease
Ostéosarcome chez la souris
Metastatic site
Poumon
Applications
Recherche sur l’ostéosarcome; modèle tumoral syngénique BALB/c; imagerie des métastases pulmonaires par bioluminescence; évaluation de médicaments antitumoraux et antimétastatiques; essais d’inhibiteurs de points de contrôle; études sur les interactions avec le système immunitaire inné (C3, FcgRI); immunothérapie du cancer des os chez l’enfant
Synonyms
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
Ostéoblaste
Tumourigenic
Oui

04Identifiers

Citation
K7M2 wt-Luc (numéro de catalogue Cytion 305684)
NCBI TaxID
10090

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Complément (C3), exprimé; récepteur Fc, IgG, haute affinité I (Fcgr1), exprimé
Antigen expression
Luc2 (firefly, optimisé au niveau des codons)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Split ratio
1 à 3
Seeding density
1-3 × 10⁴/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet additionné de 10 % de DMSO afin d’assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
895 jours