Ga naar de inhoud
K7M2 wt-Luc
Weefsel
Ascites
Ziekte
Osteosarcoom bij de muis
Plaats van uitzaaiingen
Long
Synoniemen
K7M2-WT, K7M2

Documenten

K7M2 wt-Luc

Cell line · Productnummer 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

K7M2 wt-Luc is een bioluminescent derivaat van de muizen-osteosarcoomcellijn K7M2, dat genetisch is gemodificeerd om op stabiele wijze een vuurvlieg-luciferase-reportergen tot expressie te brengen. De oorspronkelijke K7M2-cellijn is opgezet uit ascites van een spontaan osteosarcoom bij een BALB/c-muis en wordt gekenmerkt door een osteoblastische morfologie en een hoog metastatisch potentieel, met name naar de longen. K7M2 is een van de weinige syngene osteosarcoommodellen die beschikbaar zijn op de BALB/c-achtergrond, waardoor het een waardevol hulpmiddel is voor het bestuderen van de biologie van osteosarcoom, interacties tussen tumor en immuunsysteem, en de evaluatie van immunotherapiestrategieën in een immuuncompetente gastheer.

De stabiele integratie van luciferase in K7M2 wt-Luc maakt gevoelige, niet-invasieve bioluminescentiebeeldvorming (BLI) mogelijk van de groei van de primaire tumor en de verspreiding van longmetastasen bij syngene BALB/c-muizen. Na toediening van het luciferinesubstraat correleert het uitgezonden signaal met het aantal levensvatbare tumorcellen, wat longitudinale monitoring van tumorengraftment, metastatische kolonisatie en therapeutische respons mogelijk maakt zonder dat op elk tijdstip invasieve procedures nodig zijn. Dit maakt K7M2 wt-Luc bijzonder geschikt voor preklinische studies ter evaluatie van antitumorale en antimetastatische middelen, checkpointremmers en combinatietherapiestrategieën bij osteosarcoom.

K7M2 wt-Luc behoudt de biologische en immunologische eigenschappen van de oorspronkelijke K7M2-lijn, waaronder de expressie van complementcomponent C3 en Fc-gamma-receptor I (FcgRI), kenmerken die de interacties met het aangeboren immuunsysteem kunnen beïnvloeden. De luciferase-reporter vergroot de experimentele flexibiliteit en gevoeligheid aanzienlijk voor het in realtime volgen van de tumorprogressie. Onderzoekers dienen de luciferase-activiteit, de groeikinetiek en het metastatisch gedrag onder hun specifieke experimentele omstandigheden te valideren alvorens het op grote schaal in vivo te gebruiken.

Weefsel
Ascites
Ziekte
Osteosarcoom bij de muis
Plaats van uitzaaiingen
Long
Toepassingen
Onderzoek naar osteosarcoom; syngeneeuw BALB/c-tumormodel; beeldvorming van longmetastasen via bioluminescentie; evaluatie van antitumorale en antimetastatische geneesmiddelen; onderzoek naar checkpointremmers; onderzoek naar interacties met het aangeboren immuunsysteem (C3, FcgRI); immuuntherapie bij botkanker bij kinderen
Synoniemen
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Celtype
Osteoblast
Tumorverwekkend
Ja

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
K7M2 wt-Luc (Cytion-catalogusnummer 305684)
NCBI-belastingnummer
10090

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Complement(C3), uitgedrukt, Fc-receptor, IgG, hoge affiniteit I(Fcgr1), uitgedrukt
Antigeenexpressie
Luc2 (vuurvlieg, codon-geoptimaliseerd)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 3
Zaaidichtheid
1-3*10⁴/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
BALB/c
Leeftijd van de donor
895 dagen