
- Weefsel
- Ascites
- Ziekte
- Osteosarcoom bij de muis
- Plaats van uitzaaiingen
- Long
- Synoniemen
- K7M2-WT, K7M2
Documenten
K7M2 wt-Luc
Cell line · Productnummer 305684
K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...
Maatwerk / Aanbevelingen
- K7M2 wt-LucCell line€777.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
K7M2 wt-Luc is een bioluminescent derivaat van de muizen-osteosarcoomcellijn K7M2, dat genetisch is gemodificeerd om op stabiele wijze een vuurvlieg-luciferase-reportergen tot expressie te brengen. De oorspronkelijke K7M2-cellijn is opgezet uit ascites van een spontaan osteosarcoom bij een BALB/c-muis en wordt gekenmerkt door een osteoblastische morfologie en een hoog metastatisch potentieel, met name naar de longen. K7M2 is een van de weinige syngene osteosarcoommodellen die beschikbaar zijn op de BALB/c-achtergrond, waardoor het een waardevol hulpmiddel is voor het bestuderen van de biologie van osteosarcoom, interacties tussen tumor en immuunsysteem, en de evaluatie van immunotherapiestrategieën in een immuuncompetente gastheer.
De stabiele integratie van luciferase in K7M2 wt-Luc maakt gevoelige, niet-invasieve bioluminescentiebeeldvorming (BLI) mogelijk van de groei van de primaire tumor en de verspreiding van longmetastasen bij syngene BALB/c-muizen. Na toediening van het luciferinesubstraat correleert het uitgezonden signaal met het aantal levensvatbare tumorcellen, wat longitudinale monitoring van tumorengraftment, metastatische kolonisatie en therapeutische respons mogelijk maakt zonder dat op elk tijdstip invasieve procedures nodig zijn. Dit maakt K7M2 wt-Luc bijzonder geschikt voor preklinische studies ter evaluatie van antitumorale en antimetastatische middelen, checkpointremmers en combinatietherapiestrategieën bij osteosarcoom.
K7M2 wt-Luc behoudt de biologische en immunologische eigenschappen van de oorspronkelijke K7M2-lijn, waaronder de expressie van complementcomponent C3 en Fc-gamma-receptor I (FcgRI), kenmerken die de interacties met het aangeboren immuunsysteem kunnen beïnvloeden. De luciferase-reporter vergroot de experimentele flexibiliteit en gevoeligheid aanzienlijk voor het in realtime volgen van de tumorprogressie. Onderzoekers dienen de luciferase-activiteit, de groeikinetiek en het metastatisch gedrag onder hun specifieke experimentele omstandigheden te valideren alvorens het op grote schaal in vivo te gebruiken.
- Weefsel
- Ascites
- Ziekte
- Osteosarcoom bij de muis
- Plaats van uitzaaiingen
- Long
- Toepassingen
- Onderzoek naar osteosarcoom; syngeneeuw BALB/c-tumormodel; beeldvorming van longmetastasen via bioluminescentie; evaluatie van antitumorale en antimetastatische geneesmiddelen; onderzoek naar checkpointremmers; onderzoek naar interacties met het aangeboren immuunsysteem (C3, FcgRI); immuuntherapie bij botkanker bij kinderen
- Synoniemen
- K7M2-WT
- K7M2
02Classificatie
- Organisme
- Muis
- Seks
- Vrouw
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- GMO-S1
- Details over de GGO-status
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Celtype
- Osteoblast
- Tumorverwekkend
- Ja
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- K7M2 wt-Luc (Cytion-catalogusnummer 305684)
- NCBI-belastingnummer
- 10090
05Expressie en vatbaarheid
- Tot expressie gebrachte receptoren
- Complement(C3), uitgedrukt, Fc-receptor, IgG, hoge affiniteit I(Fcgr1), uitgedrukt
- Antigeenexpressie
- Luc2 (vuurvlieg, codon-geoptimaliseerd)
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Splitsingsverhouding
- 1 tot en met 3
- Zaaidichtheid
- 1-3*10⁴/cm²
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Soort / ondersoort
- BALB/c
- Leeftijd van de donor
- 895 dagen
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er is een overeenkomst inzake materiaaloverdracht vereist
- Ja