K7M2 wt-Luc
Cell line · Product number 305684
K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
K7M2 wt-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים K7M2 של אוסטאוסרקומה בעכברים, שהונדס כך שיבטא באופן יציב גן-דיווח של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים ההורי K7M2 הוקם מתוך מיימת של אוסטאוסרקומה ספונטנית בעכבר מסוג BALB/c, והוא מאופיין במורפולוגיה אוסטאובלסטית ובפוטנציאל גרורתי גבוה, במיוחד לריאות. K7M2 הוא אחד ממודלי האוסטאוסרקומה הסינגניים הבודדים הזמינים ברקע BALB/c, מה שהופך אותו לכלי חשוב לחקר הביולוגיה של האוסטאוסרקומה, האינטראקציות בין הגידול למערכת החיסון, והערכת אסטרטגיות אימונותרפיה במאכסן בעל מערכת חיסונית תקינה.
השילוב היציב של לוקיפרז ב-K7M2 wt-Luc מאפשר הדמיה רגישה ולא פולשנית באמצעות ביולומיננס (BLI) של צמיחת הגידול הראשוני והתפשטות גרורות ריאתיות בעכברי BALB/c סינגניים. לאחר מתן מצע הלוציפרין, האות הנפלט מתואם למספר תאי הגידול החיים, מה שמאפשר מעקב ארוך טווח אחר השתלת הגידול, התפשטות גרורתית ותגובה טיפולית ללא צורך בהליכים פולשניים בכל נקודת זמן. כתוצאה מכך, זן K7M2 wt-Luc מתאים במיוחד למחקרים פרה-קליניים הבוחנים חומרים נוגדי-גידול ונוגדי-גרורות, מעכבי נקודות בקרה ואסטרטגיות טיפול משולבות באוסטאוסרקומה.
K7M2 wt-Luc שומר על התכונות הביולוגיות והאימונולוגיות של קו ה-K7M2 ההורי, כולל ביטוי של מרכיב המשלים C3 ושל קולטן Fc גמא I (FcgRI) – תכונות העשויות להשפיע על האינטראקציות עם המערכת החיסונית המולדת. הרפורט של לוקיפרז משפר באופן משמעותי את הגמישות והרגישות הניסויית למעקב בזמן אמת אחר התקדמות הגידול. על החוקרים לאמת את פעילות הלוציפרז, את קינטיקת הצמיחה ואת דפוס הגרורות בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם, לפני שימוש בקנה מידה נרחב in vivo.
- Tissue
- מיימת
- Disease
- אוסטאוסרקומה בעכבר
- Metastatic site
- ריאה
- Applications
- מחקר בנושא אוסטאוסרקומה; מודל גידול סינגני מסוג BALB/c; הדמיה של גרורות ריאתיות באמצעות ביולומיננס; הערכת תרופות נגד גידולים ונגד גרורות; בדיקות מעכבי נקודות בקרה; מחקרים על אינטראקציות של המערכת החיסונית המולדת (C3, FcgRI); אימונותרפיה לסרטן העצם בילדים
- Synonyms
- K7M2-WT
- K7M2
02Classification
- Organism
- Mouse
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Cell type
- אוסטאובלסט
- Tumourigenic
- כן
04Identifiers
- Citation
- K7M2 wt-Luc (מספר קטלוג Cytion 305684)
- NCBI TaxID
- 10090
05Expression and susceptibility
- Receptors expressed
- משלים (C3), מבוטא, קולטן Fc, IgG, זיקה גבוהה I(Fcgr1), מבוטא
- Antigen expression
- Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Split ratio
- 1 עד 3
- Seeding density
- 1–3*10^4/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Breed / subspecies
- BALB/c
- Donor age
- 895 ימים
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
