Skip to content
K7M2 wt-Luc
Tissue
מיימת
Disease
אוסטאוסרקומה בעכבר
Metastatic site
ריאה
Synonyms
K7M2-WT, K7M2

Documents

K7M2 wt-Luc

Cell line · Product number 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

US$777.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

K7M2 wt-Luc הוא נגזרת ביולומינסצנטית של קו התאים K7M2 של אוסטאוסרקומה בעכברים, שהונדס כך שיבטא באופן יציב גן-דיווח של לוקיפרז של גחלילית. קו התאים ההורי K7M2 הוקם מתוך מיימת של אוסטאוסרקומה ספונטנית בעכבר מסוג BALB/c, והוא מאופיין במורפולוגיה אוסטאובלסטית ובפוטנציאל גרורתי גבוה, במיוחד לריאות. K7M2 הוא אחד ממודלי האוסטאוסרקומה הסינגניים הבודדים הזמינים ברקע BALB/c, מה שהופך אותו לכלי חשוב לחקר הביולוגיה של האוסטאוסרקומה, האינטראקציות בין הגידול למערכת החיסון, והערכת אסטרטגיות אימונותרפיה במאכסן בעל מערכת חיסונית תקינה.

השילוב היציב של לוקיפרז ב-K7M2 wt-Luc מאפשר הדמיה רגישה ולא פולשנית באמצעות ביולומיננס (BLI) של צמיחת הגידול הראשוני והתפשטות גרורות ריאתיות בעכברי BALB/c סינגניים. לאחר מתן מצע הלוציפרין, האות הנפלט מתואם למספר תאי הגידול החיים, מה שמאפשר מעקב ארוך טווח אחר השתלת הגידול, התפשטות גרורתית ותגובה טיפולית ללא צורך בהליכים פולשניים בכל נקודת זמן. כתוצאה מכך, זן K7M2 wt-Luc מתאים במיוחד למחקרים פרה-קליניים הבוחנים חומרים נוגדי-גידול ונוגדי-גרורות, מעכבי נקודות בקרה ואסטרטגיות טיפול משולבות באוסטאוסרקומה.

K7M2 wt-Luc שומר על התכונות הביולוגיות והאימונולוגיות של קו ה-K7M2 ההורי, כולל ביטוי של מרכיב המשלים C3 ושל קולטן Fc גמא I (FcgRI) – תכונות העשויות להשפיע על האינטראקציות עם המערכת החיסונית המולדת. הרפורט של לוקיפרז משפר באופן משמעותי את הגמישות והרגישות הניסויית למעקב בזמן אמת אחר התקדמות הגידול. על החוקרים לאמת את פעילות הלוציפרז, את קינטיקת הצמיחה ואת דפוס הגרורות בתנאי הניסוי הספציפיים שלהם, לפני שימוש בקנה מידה נרחב in vivo.

Tissue
מיימת
Disease
אוסטאוסרקומה בעכבר
Metastatic site
ריאה
Applications
מחקר בנושא אוסטאוסרקומה; מודל גידול סינגני מסוג BALB/c; הדמיה של גרורות ריאתיות באמצעות ביולומיננס; הערכת תרופות נגד גידולים ונגד גרורות; בדיקות מעכבי נקודות בקרה; מחקרים על אינטראקציות של המערכת החיסונית המולדת (C3, FcgRI); אימונותרפיה לסרטן העצם בילדים
Synonyms
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
אוסטאובלסט
Tumourigenic
כן

04Identifiers

Citation
K7M2 wt-Luc (מספר קטלוג Cytion 305684)
NCBI TaxID
10090

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
משלים (C3), מבוטא, קולטן Fc, IgG, זיקה גבוהה I(Fcgr1), מבוטא
Antigen expression
Luc2 (גחלילית, מותאם לקודונים)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Split ratio
1 עד 3
Seeding density
1–3*10^4/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
895 ימים