Přejít na obsah
K7M2 wt-Luc
Tkáň
Ascites
Nemoc
Myší osteosarkom
Místo metastázy
Plíce
Synonyma
K7M2-WT, K7M2

Dokumenty

K7M2 wt-Luc

Cell line · Číslo výrobku 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

K7M2 wt-Luc je bioluminiscenční derivát myší buněčné linie osteosarkomu K7M2, geneticky upravený tak, aby stabilně exprimoval reportérový gen luciferázy světlušky. Původní buněčná linie K7M2 byla izolována z ascitu spontánního osteosarkomu u myši kmene BALB/c a vyznačuje se osteoblastickou morfologií a vysokým metastatickým potenciálem, zejména do plic. K7M2 je jedním z mála syngenních modelů osteosarkomu dostupných na pozadí kmene BALB/c, což z něj činí cenný nástroj pro studium biologie osteosarkomu, interakcí mezi nádorem a imunitním systémem a hodnocení strategií imunoterapie u imunokompetentního hostitele.

Stabilní integrace luciferázy v linii K7M2 wt-Luc umožňuje citlivé, neinvazivní bioluminiscenční zobrazování (BLI) růstu primárního nádoru a šíření plicních metastáz u syngenních myší BALB/c. Po podání substrátu luciferinu koreluje emitovaný signál s počtem životaschopných nádorových buněk, což umožňuje dlouhodobé sledování přihojení nádoru, metastatické kolonizace a terapeutické odpovědi bez nutnosti invazivních zákroků v jednotlivých časových bodech. Díky tomu je linie K7M2 wt-Luc obzvláště vhodná pro předklinické studie hodnotící protinádorová a protimetastatická činidla, inhibitory kontrolních bodů a strategie kombinované léčby u osteosarkomu.

K7M2 wt-Luc si zachovává biologické a imunologické vlastnosti mateřské linie K7M2, včetně exprese složky komplementu C3 a Fc-gamma receptoru I (FcgRI), což jsou vlastnosti, které mohou ovlivňovat interakce s kompartmentem vrozené imunity. Luciferázový reportér podstatně zvyšuje experimentální flexibilitu a citlivost pro sledování progrese nádoru v reálném čase. Výzkumníci by měli před rozsáhlým použitím in vivo ověřit aktivitu luciferázy, růstovou kinetiku a metastatické chování za svých specifických experimentálních podmínek.

Tkáň
Ascites
Nemoc
Myší osteosarkom
Místo metastázy
Plíce
Aplikace
Výzkum osteosarkomu; syngenní nádorový model BALB/c; zobrazování plicních metastáz pomocí bioluminiscence; hodnocení protinádorových a protimetastatických léčiv; testování inhibitorů kontrolních bodů; studie interakcí s vrozenou imunitou (C3, FcgRI); imunoterapie dětských kostních nádorů
Synonyma
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Typ buňky
Osteoblasty
Tumorogenní
Ano

04Identifikátory

Citace
K7M2 wt-Luc (katalogové číslo Cytion 305684)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090

05Exprese a náchylnost

Exprimované receptory
Komplement(C3), exprimovaný, Fc receptor, IgG, vysoká afinita I(Fcgr1), exprimovaný
Exprese antigenu
Luc2 (světluška, s optimalizovanými kodony)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
BALB/c
Věk dárce
895 dní