K7M2 wt-Luc
Cell line · Číslo výrobku 305684
K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...
Přizpůsobení / Doporučení
- K7M2 wt-LucCell line€777.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
K7M2 wt-Luc je bioluminiscenční derivát myší buněčné linie osteosarkomu K7M2, geneticky upravený tak, aby stabilně exprimoval reportérový gen luciferázy světlušky. Původní buněčná linie K7M2 byla izolována z ascitu spontánního osteosarkomu u myši kmene BALB/c a vyznačuje se osteoblastickou morfologií a vysokým metastatickým potenciálem, zejména do plic. K7M2 je jedním z mála syngenních modelů osteosarkomu dostupných na pozadí kmene BALB/c, což z něj činí cenný nástroj pro studium biologie osteosarkomu, interakcí mezi nádorem a imunitním systémem a hodnocení strategií imunoterapie u imunokompetentního hostitele.
Stabilní integrace luciferázy v linii K7M2 wt-Luc umožňuje citlivé, neinvazivní bioluminiscenční zobrazování (BLI) růstu primárního nádoru a šíření plicních metastáz u syngenních myší BALB/c. Po podání substrátu luciferinu koreluje emitovaný signál s počtem životaschopných nádorových buněk, což umožňuje dlouhodobé sledování přihojení nádoru, metastatické kolonizace a terapeutické odpovědi bez nutnosti invazivních zákroků v jednotlivých časových bodech. Díky tomu je linie K7M2 wt-Luc obzvláště vhodná pro předklinické studie hodnotící protinádorová a protimetastatická činidla, inhibitory kontrolních bodů a strategie kombinované léčby u osteosarkomu.
K7M2 wt-Luc si zachovává biologické a imunologické vlastnosti mateřské linie K7M2, včetně exprese složky komplementu C3 a Fc-gamma receptoru I (FcgRI), což jsou vlastnosti, které mohou ovlivňovat interakce s kompartmentem vrozené imunity. Luciferázový reportér podstatně zvyšuje experimentální flexibilitu a citlivost pro sledování progrese nádoru v reálném čase. Výzkumníci by měli před rozsáhlým použitím in vivo ověřit aktivitu luciferázy, růstovou kinetiku a metastatické chování za svých specifických experimentálních podmínek.
- Tkáň
- Ascites
- Nemoc
- Myší osteosarkom
- Místo metastázy
- Plíce
- Aplikace
- Výzkum osteosarkomu; syngenní nádorový model BALB/c; zobrazování plicních metastáz pomocí bioluminiscence; hodnocení protinádorových a protimetastatických léčiv; testování inhibitorů kontrolních bodů; studie interakcí s vrozenou imunitou (C3, FcgRI); imunoterapie dětských kostních nádorů
- Synonyma
- K7M2-WT
- K7M2
02Klasifikace
- Organismus
- Myš
- Sex
- Žena
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Stav GMO
- GMO-S1
- Podrobnosti o statusu GMO
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Typ buňky
- Osteoblasty
- Tumorogenní
- Ano
04Identifikátory
- Citace
- K7M2 wt-Luc (katalogové číslo Cytion 305684)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 10090
05Exprese a náchylnost
- Exprimované receptory
- Komplement(C3), exprimovaný, Fc receptor, IgG, vysoká afinita I(Fcgr1), exprimovaný
- Exprese antigenu
- Luc2 (světluška, s optimalizovanými kodony)
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Poměr rozdělení
- 1 až 3
- Hustota výsevu
- 1–3 × 10⁴/cm²
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Plemeno / poddruh
- BALB/c
- Věk dárce
- 895 dní
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Je nutná smlouva o převodu materiálu
- Ano
