Перейти до вмісту
K7M2 wt-Luc
Тканина
Асцит
Хвороба
Остеосаркома миші
Місце метастазування
Легені
Синоніми
K7M2-WT, K7M2

Документи

K7M2 wt-Luc

Cell line · Номер товару 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00без урахування податків та вартості доставки

Налаштування / Рекомендації

Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

K7M2 wt-Luc — це біолюмінесцентний варіант мишачої клітинної лінії остеосаркоми K7M2, модифікований для стабільної експресії репортерного гена люциферази світлячка. Базова клітинна лінія K7M2 була створена з асциту миші лінії BALB/c із спонтанною остеосаркомою та характеризується остеобластичною морфологією та високим метастатичним потенціалом, особливо до легень. K7M2 — одна з небагатьох сингенних моделей остеосаркоми, доступних на тлі BALB/c, що робить її цінним інструментом для вивчення біології остеосаркоми, взаємодій між пухлиною та імунною системою, а також для оцінки стратегій імунотерапії в імунокомпетентному хазяїні.

Стабільна інтеграція люциферази в K7M2 wt-Luc дозволяє проводити чутливу, неінвазивну біолюмінесцентну візуалізацію (BLI) росту первинної пухлини та поширення легеневих метастазів у сингенних мишей BALB/c. Після введення субстрату люциферину випромінюваний сигнал корелює з кількістю життєздатних пухлинних клітин, що дозволяє здійснювати довготривалий моніторинг приживлення пухлини, метастатичної колонізації та терапевтичної відповіді без інвазивних процедур у кожній часовій точці. Це робить K7M2 wt-Luc особливо придатною для доклінічних досліджень з оцінки протипухлинних та протиметастатичних засобів, інгібіторів контрольних точок та стратегій комбінованого лікування остеосаркоми.

K7M2 wt-Luc зберігає біологічні та імунологічні властивості батьківської лінії K7M2, включаючи експресію компонента комплементу C3 та Fc-гамма-рецептора I (FcgRI) — особливості, які можуть впливати на взаємодію з вродженим імунним комплексом. Репортер люциферази суттєво підвищує експериментальну гнучкість та чутливість для відстеження прогресування пухлини в режимі реального часу. До початку широкомасштабного застосування in vivo дослідникам слід перевірити активність люциферази, кінетику росту та метастатичну поведінку в своїх конкретних експериментальних умовах.

Тканина
Асцит
Хвороба
Остеосаркома миші
Місце метастазування
Легені
Застосування
Дослідження остеосаркоми; сингенна пухлинна модель BALB/c; візуалізація легеневих метастазів за допомогою біолюмінесценції; оцінка протипухлинних та протиметастатичних препаратів; випробування інгібіторів контрольних точок; дослідження взаємодії з вродженим імунітетом (C3, FcgRI); імунотерапія раку кісток у дітей
Синоніми
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Статус ГМО
GMO-S1
Детальна інформація щодо статусу ГМО
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Тип клітини
Остеобласт
Пухлиноутворювальний
Так

04Ідентифікатори

Посилання
K7M2 wt-Luc (номер у каталозі Cytion — 305684)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090

05Експресія та сприйнятливість

Рецептори, що експресуються
Комплемент (C3), експресується, Fc рецептор, IgG, високоафінний I (Fcgr1), експресується
Експресія антигену
Luc2 (світлячок, з оптимізованими кодонами)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
ДМЕМ, w: 4,5 г/л Глюкоза, w: 4 мМ L-глутамін, w: 3,7 г/л NaHCO3, w: 1,0 мМ піруват натрію (цит. номер 820300a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Коефіцієнт розподілу
від 1 до 3
Щільність висіву
1–3 × 10⁴/см²
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Контроль якості та кріоконсервація

Середовище для заморожування
В якості середовища для кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після розморожування.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
BALB/c
Вік донора
895 днів