Preskoči na vsebino
K7M2 wt-Luc
Tkivo
Ascites
Bolezen
Osteosarkom miši
Mesto metastaze
Pljuča
Sinonimi
K7M2-WT, K7M2

Dokumenti

K7M2 wt-Luc

Cell line · Številka izdelka 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

K7M2 wt-Luc je bioluminiscenčni derivat mišje celične linije osteosarkoma K7M2, ki je bil genetsko spremenjen tako, da stabilno izraža reporterni gen luciferaze svetleče mušice. Izvorna celična linija K7M2 je bila vzpostavljena iz ascitesa spontanega osteosarkoma pri miški BALB/c in jo zaznamujejo osteoblastna morfologija ter visok metastazni potencial, zlasti v pljuča. K7M2 je eden redkih singenih modelov osteosarkoma, ki so na voljo na podlagi linije BALB/c, kar ga naredi za dragoceno orodje za preučevanje biologije osteosarkoma, interakcij med tumorjem in imunskim sistemom ter za ocenjevanje strategij imunoterapije v imunokompetentnem gostitelju.

Stabilna integracija luciferaze v liniji K7M2 wt-Luc omogoča občutljivo, neinvazivno bioluminiscenčno slikanje (BLI) rasti primarnega tumorja in pljučnega metastatskega širjenja pri singenih miših BALB/c. Po dajanju substrata luciferina se oddani signal korelira s številom živih tumorskih celic, kar omogoča longitudinalno spremljanje vgrajevanja tumorja, metastatske kolonizacije in terapevtskega odziva brez invazivnih posegov v vsakem časovnem trenutku. Zaradi tega je linija K7M2 wt-Luc še posebej primerna za predklinične študije, v katerih se ocenjujejo protitumorska in protimetastazna zdravila, zaviralci kontrolnih točk ter strategije kombiniranega zdravljenja pri osteosarkomu.

K7M2 wt-Luc ohranja biološke in imunološke lastnosti izvorne linije K7M2, vključno z izražanjem komplementne komponente C3 in Fc-gama receptorja I (FcgRI), kar so značilnosti, ki lahko vplivajo na interakcije s sistemom prirojenega imunskega odziva. Reporterna luciferaza bistveno poveča eksperimentalno fleksibilnost in občutljivost za spremljanje napredovanja tumorja v realnem času. Raziskovalci morajo pred obsežno uporabo in vivo v svojih specifičnih eksperimentalnih pogojih validirati aktivnost luciferaze, kinetično rast in metastazno obnašanje.

Tkivo
Ascites
Bolezen
Osteosarkom miši
Mesto metastaze
Pljuča
Uporaba
Raziskave osteosarkoma; singenični tumorski model BALB/c; slikanje pljučnih metastaz z bioluminiscenco; ocenjevanje protitumorskih in protimetastatičnih zdravil; testiranje zaviralcev kontrolnih točk; študije interakcij prirojenega imunskega sistema (C3, FcgRI); imunoterapija otroškega raka kosti
Sinonimi
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Vrsta celice
Osteoblast
Tumorigeničen
Da

04Identifikatorji

Navajanje vira
K7M2 wt-Luc (kataloška številka Cytion 305684)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Komplement(C3), izražen, Fc receptor, IgG, visoka afiniteta I(Fcgr1), izražen
Ekspresija antigena
Luc2 (svetlobna mušica, kodonsko optimizirana)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 3
Gostota setve
1–3 × 10⁴/cm²
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za krioprezervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
BALB/c
Starost darovalca
895 dni