İçeriğe atla
K7M2 wt-Luc
Doku
Asit
Hastalık
Fare osteosarkomu
Metastaz yeri
Akciğer
Eş anlamlılar
K7M2-WT, K7M2

K7M2 wt-Luc

Cell line · Ürün numarası 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

K7M2 wt-Luc, fare K7M2 osteosarkom hücre hattının biyolüminesan bir türevidir ve ateşböceği lusiferaz raportör genini istikrarlı bir şekilde eksprese edecek şekilde tasarlanmıştır. Ana K7M2 hücre hattı, bir BALB/c faresinde spontan osteosarkomun asitinden oluşturulmuştur ve osteoblastik morfoloji ile özellikle akciğerlere yönelik yüksek metastaz potansiyeli ile karakterize edilir. K7M2, BALB/c arka planında mevcut olan az sayıdaki singenik osteosarkom modelinden biridir; bu da onu, osteosarkom biyolojisini, tümör-bağışıklık etkileşimlerini ve immünokompetan bir konakta immünoterapi stratejilerinin değerlendirilmesini incelemek için değerli bir araç haline getirir.

K7M2 wt-Luc'taki stabil lusiferaz entegrasyonu, singenik BALB/c farelerde primer tümör büyümesinin ve pulmoner metastatik yayılımın hassas, noninvaziv biyolüminesans görüntülemesini (BLI) mümkün kılar. Lüserin substratının uygulanmasının ardından yayılan sinyal, canlı tümör hücresi sayısı ile korelasyon gösterir; bu da her zaman noktasında invaziv prosedürlere gerek kalmaksızın tümör greftlenmesi, metastatik kolonizasyon ve terapötik yanıtın uzun süreli izlenmesini destekler. Bu özellik, K7M2 wt-Luc'u osteosarkomda anti-tümör ve anti-metastatik ajanları, kontrol noktası inhibitörlerini ve kombinasyon tedavi stratejilerini değerlendiren preklinik çalışmalar için özellikle uygun hale getirir.

K7M2 wt-Luc, kompleman bileşeni C3 ve Fc gama reseptörü I (FcgRI) ekspresyonu dahil olmak üzere, ana K7M2 hattının biyolojik ve immünolojik özelliklerini korur; bu özellikler, doğuştan gelen bağışıklık sistemi ile etkileşimleri etkileyebilir. Lüseraz raportörü, tümör ilerlemesinin gerçek zamanlı takibi için deneysel esnekliği ve duyarlılığı önemli ölçüde artırır. Araştırmacılar, büyük ölçekli in vivo kullanıma geçmeden önce, kendi spesifik deney koşulları altında lusiferaz aktivitesini, büyüme kinetiğini ve metastatik davranışı doğrulamalıdır.

Doku
Asit
Hastalık
Fare osteosarkomu
Metastaz yeri
Akciğer
Uygulamalar
Osteosarkom araştırması; singenik BALB/c tümör modeli; biyolüminesans yoluyla pulmoner metastaz görüntüleme; antitümör ve antimetastatik ilaç değerlendirmesi; kontrol noktası inhibitörü testleri; doğuştan gelen bağışıklık sistemi etkileşim çalışmaları (C3, FcgRI); pediatrik kemik kanseri immünoterapisi
Eş anlamlılar
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Hücre türü
Osteoblast
Tümör oluşturucu
Evet

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
K7M2 wt-Luc (Cytion katalog numarası 305684)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
Kompleman (C3), ifade edilmiş, Fc reseptörü, IgG, yüksek afiniteli I(Fcgr1), ifade edilmiş
Antijen ekspresyonu
Luc2 (ateşböceği, kodon optimizasyonlu)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Bölünme oranı
1'den 3'e kadar
Ekim yoğunluğu
1–3 × 10⁴/cm²
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
BALB/c
Bağışçının yaşı
895 gün