Mine otse sisu juurde
K7M2 wt-Luc
Kude
Astsiit
Haigus
Hiirte osteosarkoom
Metastaaside asukoht
Kopsud
Sünonüümid
K7M2-WT, K7M2

Dokumendid

K7M2 wt-Luc

Cell line · Toote number 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

K7M2 wt-Luc on hiire K7M2 osteosarkoomi rakuliini bioluminestsentne derivaat, mis on geneetiliselt muundatud väljendama stabiilselt särava liblika lusiferaasi reportergeeni. Algrakuliin K7M2 loodi BALB/c hiire spontaanse osteosarkoomi asitsiidist ning seda iseloomustab osteoblastiline morfoloogia ja kõrge metastaasipotentsiaal, eriti kopsudesse. K7M2 on üks väheseid BALB/c-taustaga kättesaadavaid süngeneetilisi osteosarkoomi mudeleid, mis teeb sellest väärtusliku vahendi osteosarkoomi bioloogia, tuumori ja immuunsüsteemi vastastikmõjude uurimiseks ning immunoteraapiastrateegiate hindamiseks immuunkompetentses peremeesorganismis.

Stabiilne lusiferaasi integratsioon K7M2 wt-Luc-is võimaldab tundlikku, mitteinvasiivset bioluminestsentskuvamist (BLI) primaarse kasvaja kasvu ja kopsudesse levivate metastaaside jälgimiseks süngeneetsetel BALB/c hiirtel. Pärast lusiferini substraadi manustamist korrelatsioonib kiiratav signaal elujõuliste kasvajarakkude arvuga, võimaldades kasvaja juurdumise, metastaatilise leviku ja ravivastuse pikaajalist jälgimist ilma igal ajahetkel invasiivseid protseduure läbi viimata. Seetõttu sobib K7M2 wt-Luc eriti hästi prekliinilistesse uuringutesse, milles hinnatakse osteosarkoomi puhul kasvajavastaseid ja metastaasivastaseid ravimeid, kontrollpunkti inhibiitoreid ning kombinatsioonravi strateegiaid.

K7M2 wt-Luc säilitab emaliini K7M2 bioloogilised ja immunoloogilised omadused, sealhulgas komplementkomponendi C3 ja Fc-gamma-retseptori I (FcgRI) ekspressiooni – need omadused võivad mõjutada interaktsioone loomuliku immuunsüsteemiga. Lusiferase-reporter suurendab oluliselt eksperimentaalseid võimalusi ja tundlikkust kasvaja progressiooni reaalajas jälgimiseks. Teadlased peaksid enne laiaulatuslikku in vivo kasutamist valideerima lusiferaasi aktiivsuse, kasvu kineetika ja metastaaside tekke oma konkreetsetes katsetingimustes.

Kude
Astsiit
Haigus
Hiirte osteosarkoom
Metastaaside asukoht
Kopsud
Rakendused
Osteosarkoomi uurimine; süngeenne BALB/c kasvajamudel; kopsumetastaaside kuvamine bioluminestsentsi abil; kasvajavastaste ja metastaasivastaste ravimite hindamine; kontrollpunkti inhibiitorite testimine; loomuliku immuunsüsteemi koostoime uuringud (C3, FcgRI); laste luuvähi immunoteraapia
Sünonüümid
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Osteoblastid
Tuumorigeenne
Jah

04Tunnused

Viide
K7M2 wt-Luc (Cytioni katalooginumber 305684)
NCBI maksukood
10090

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Komplement(C3), ekspresseeritud, Fc retseptor, IgG, kõrge afiinsusega I(Fcgr1), ekspresseeritud
Antigeeni ekspressioon
Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
1–3 × 10⁴/cm²
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
BALB/c
Doonori vanus
895 päeva