Siirry sisältöön
K7M2 wt-Luc
Kudos
Askites
Sairaus
Hiiren osteosarkooma
Metastaasikohde
Keuhkot
Synonyymit
K7M2-WT, K7M2

Asiakirjat

K7M2 wt-Luc

Cell line · Tuotenumero 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

K7M2 wt-Luc on hiiren K7M2-osteosarkoomasolulinjan bioluminesoiva johdannainen, joka on muokattu ilmentämään vakaasti tulikärpäsen lusiferaasi-raportointigeeniä. Alkuperäinen K7M2-solulinja on peräisin BALB/c-hiiren spontaanin osteosarkooman askitesnesteestä, ja sille on ominaista osteoblastinen morfologia sekä suuri metastaattinen potentiaali, erityisesti keuhkoihin. K7M2 on yksi harvoista BALB/c-taustalla saatavilla olevista syngeneisistä osteosarkoomamalleista, mikä tekee siitä arvokkaan työkalun osteosarkooman biologian ja kasvaimen ja immuunijärjestelmän välisten vuorovaikutusten tutkimiseen sekä immunoterapiastrategioiden arviointiin immuunitoiminnaltaan normaalissa isännässä.

Vakaa lusiferaasin integraatio K7M2 wt-Luc -solulinjassa mahdollistaa herkän, ei-invasiivisen bioluminesenssikuvantamisen (BLI) primaarisen kasvaimen kasvun ja keuhkoihin suuntautuvan metastaattisen leviämisen seurannassa syngeneisissä BALB/c-hiirissä. Lusiferiinisubstraatin antamisen jälkeen lähetetty signaali korreloi elävien kasvainsolujen lukumäärän kanssa, mikä mahdollistaa kasvaimen kiinnittymisen, metastaattisen leviämisen ja hoitovasteen pitkittäisseurannan ilman invasiivisia toimenpiteitä kussakin mittauspisteessä. Tämän ansiosta K7M2 wt-Luc sopii erityisen hyvin prekliinisiin tutkimuksiin, joissa arvioidaan kasvaimen- ja etäpesäkkeiden vastaisia aineita, tarkistuspisteiden estäjiä sekä yhdistelmähoitostrategioita osteosarkoomassa.

K7M2 wt-Luc säilyttää emolinjan K7M2 biologiset ja immunologiset ominaisuudet, mukaan lukien komplementtikomponentin C3:n ja Fc-gamma-reseptori I:n (FcgRI) ilmentymisen – ominaisuudet, jotka voivat vaikuttaa vuorovaikutuksiin luontaisen immuunijärjestelmän kanssa. Lusiferaasi-raportteri parantaa merkittävästi kokeellista joustavuutta ja herkkyyttä kasvaimen etenemisen reaaliaikaisessa seurannassa. Tutkijoiden tulee validoida lusiferaasiaktiivisuus, kasvukineettiset ominaisuudet ja metastaattinen käyttäytyminen omissa kokeellisissa olosuhteissaan ennen laajamittaista in vivo -käyttöä.

Kudos
Askites
Sairaus
Hiiren osteosarkooma
Metastaasikohde
Keuhkot
Sovellukset
Osteosarkooman tutkimus; syngeneinen BALB/c-kasvainmalli; keuhkometastaasien kuvantaminen bioluminesenssin avulla; kasvainten ja metastaasien estolääkkeiden arviointi; tarkistuspisteinhibiittorien testaus; luontaisen immuunijärjestelmän vuorovaikutustutkimukset (C3, FcgRI); lasten luusyövän immunoterapia
Synonyymit
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Osteoblastit
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä

04Tunnisteet

Lähdeviite
K7M2 wt-Luc (Cytionin tuotenumero 305684)
NCBI-verotunnus
10090

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Komplementti (C3), ilmaistu, Fc-reseptori, IgG, korkea affiniteetti I (Fcgr1), ilmaistu
Antigeenin ilmentyminen
Luc2 (tulikärpänen, kodonoptimoitu)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–3
Kylvötiheys
1–3 × 10⁴/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
BALB/c
Luovuttajan ikä
895 päivää