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K7M2 wt-Luc
ティッシュ
腹水
病気
マウス骨肉腫
転移部位
肺
同義語
K7M2-WT, K7M2

文書

K7M2 wt-Luc

Cell line · 製品番号 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

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01概要

説明

K7M2 wt-Lucは、マウスK7M2骨肉腫細胞株の生物発光型派生株であり、ホタルルシフェラーゼレポーター遺伝子を安定発現するように改変されたものである。 親株であるK7M2細胞株は、BALB/cマウスにおける自然発生性骨肉腫の腹水から樹立されたもので、骨芽細胞様形態と、特に肺への高い転移能を特徴としています。 K7M2 は、BALB/c 系統で利用可能な数少ない同系骨肉腫モデルの一つであり、免疫能を有する宿主における骨肉腫の生物学、腫瘍と免疫系の相互作用、および免疫療法戦略の評価を研究するための貴重なツールとなっています。

K7M2 wt-Luc へのルシフェラーゼの安定的な組み込みにより、同系 BALB/c マウスにおける原発腫瘍の増殖および肺への転移の広がりを、高感度かつ非侵襲的な生物発光イメージング（BLI）で観察することが可能になります。 ルシフェリン基質を投与すると、放出される信号は生存腫瘍細胞数と相関するため、各時点での侵襲的な処置を行うことなく、腫瘍の生着、転移性コロニー形成、および治療反応の経時的モニタリングが可能となります。 このため、K7M2 wt-Lucは、骨肉腫における抗腫瘍剤、抗転移剤、チェックポイント阻害剤、および併用療法戦略を評価する前臨床研究に特に適しています。

K7M2 wt-Luc は、補体成分 C3 および Fc ガンマ受容体 I (FcgRI) の発現を含め、親株である K7M2 系統の生物学的および免疫学的特性を保持しており、これらの特性は自然免疫系との相互作用に影響を与える可能性があります。ルシフェラーゼレポーターは、腫瘍の進行をリアルタイムで追跡するための実験の柔軟性と感度を大幅に向上させます。 研究者は、大規模な生体内試験を行う前に、各自の特定の実験条件下において、ルシフェラーゼ活性、増殖動態、および転移挙動を検証すべきである。

ティッシュ
腹水
病気
マウス骨肉腫
転移部位
肺
用途
骨肉腫の研究；同系BALB/c腫瘍モデル；生物発光を用いた肺転移のイメージング；抗腫瘍薬および抗転移薬の評価；チェックポイント阻害剤の試験；自然免疫との相互作用に関する研究（C3、FcgRI）；小児骨がんの免疫療法
同義語
  • K7M2-WT
  • K7M2

02分類

生物
マウス
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

細胞の種類
骨芽細胞
腫瘍形成性
はい

04識別子

引用
K7M2 wt-Luc（Cytion カタログ番号 305684）
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
Not assigned (K7M2 wt-Luc reporter derivative; parental K7M2 syngeneic BALB/c osteosarcoma)

05発現と感受性

発現している受容体
補体(C3), 発現, Fc受容体, IgG, 高親和性I(Fcgr1), 発現
抗原発現
Luc2（ホタル、コドン最適化）

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w：4.5g/Lグルコース、w：4mM L-グルタミン、w：3.7g/L NaHCO3、w：1.0mMピルビン酸ナトリウム（Cytion品番820300a）
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
分割比率
1～3
播種密度
1-3×10^4/cm²
流体の更新
週2～3回
解凍と培養

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07品質管理と凍結保存

凍結培地
凍結保存培地としては、解凍後の生存率を十分に高めるため、完全増殖培地＋10％DMSOを使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種／亜種
BALB/c
ドナーの年齢
895日