Skip to content
K7M2 wt-Luc
Tissue
Tràn dịch màng bụng
Disease
U xương ở chuột
Metastatic site
Phổi
Synonyms
K7M2-WT, K7M2

Documents

K7M2 wt-Luc

Cell line · Product number 305684

K7M2 wt-Luc is a bioluminescent derivative of the murine K7M2 osteosarcoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. The...

€777.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

K7M2 wt-Luc là một biến thể phát quang sinh học của dòng tế bào u xương K7M2 ở chuột, được biến đổi gen để biểu hiện ổn định gen báo cáo luciferase của đom đóm. Dòng tế bào K7M2 gốc được thiết lập từ dịch màng bụng của một trường hợp u xương ác tính tự phát ở chuột BALB/c và được đặc trưng bởi hình thái tế bào tạo xương và khả năng di căn cao, đặc biệt là đến phổi. K7M2 là một trong số ít các mô hình u xương ác tính đồng gen có sẵn trên nền gen BALB/c, khiến nó trở thành một công cụ quý giá để nghiên cứu sinh học u xương ác tính, tương tác giữa khối u và hệ miễn dịch, cũng như đánh giá các chiến lược liệu pháp miễn dịch trong một vật chủ có khả năng miễn dịch bình thường.

Việc tích hợp luciferase ổn định trong K7M2 wt-Luc cho phép chụp ảnh sinh quang (BLI) nhạy cảm, không xâm lấn để theo dõi sự phát triển của khối u nguyên phát và sự lan rộng di căn phổi ở chuột BALB/c đồng gen. Sau khi tiêm chất nền luciferin, tín hiệu phát ra tương quan với số lượng tế bào khối u còn sống, hỗ trợ việc theo dõi theo chiều dọc sự cấy ghép khối u, sự xâm lấn di căn và phản ứng điều trị mà không cần các thủ thuật xâm lấn tại mỗi thời điểm. Điều này khiến K7M2 wt-Luc đặc biệt phù hợp cho các nghiên cứu tiền lâm sàng đánh giá các tác nhân chống khối u và chống di căn, chất ức chế điểm kiểm soát miễn dịch, cũng như các chiến lược điều trị kết hợp trong ung thư xương.

K7M2 wt-Luc vẫn giữ nguyên các đặc tính sinh học và miễn dịch của dòng K7M2 gốc, bao gồm biểu hiện thành phần bổ thể C3 và thụ thể Fc gamma I (FcgRI) – những đặc điểm có thể ảnh hưởng đến tương tác với hệ miễn dịch bẩm sinh. Báo cáo viên luciferase này giúp tăng cường đáng kể tính linh hoạt và độ nhạy của thí nghiệm trong việc theo dõi tiến triển khối u theo thời gian thực. Các nhà nghiên cứu nên xác nhận hoạt tính luciferase, động học tăng trưởng và hành vi di căn trong các điều kiện thí nghiệm cụ thể của mình trước khi sử dụng trên quy mô lớn trong cơ thể sống.

Tissue
Tràn dịch màng bụng
Disease
U xương ở chuột
Metastatic site
Phổi
Applications
Nghiên cứu về u xương ác tính; mô hình khối u đồng gen BALB/c; chẩn đoán hình ảnh di căn phổi bằng phương pháp phát quang sinh học; đánh giá thuốc chống ung thư và chống di căn; thử nghiệm chất ức chế điểm kiểm soát miễn dịch; nghiên cứu tương tác với hệ miễn dịch bẩm sinh (C3, FcgRI); liệu pháp miễn dịch điều trị ung thư xương ở trẻ em
Synonyms
  • K7M2-WT
  • K7M2

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
Tế bào tạo xương
Tumourigenic
Có

04Identifiers

Citation
K7M2 wt-Luc (mã sản phẩm Cytion 305684)
NCBI TaxID
10090

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Complement (C3), được biểu hiện, thụ thể Fc, IgG, thụ thể Fc có ái lực cao I (Fcgr1), được biểu hiện
Antigen expression
Luc2 (đom đóm, được tối ưu hóa mã bộ ba)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Split ratio
1 đến 3
Seeding density
1–3 × 10⁴/cm²
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
Với tư cách là môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sót sau khi rã đông.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
895 ngày