NCI-H322

NCI-H322 est une lignée cellulaire humaine de cancer du poumon non à petites cellules (CPNPC) dérivée d'un patient adulte atteint d'un carcinome bronchioalvéolaire, un sous-type histologique d'adénocarcinome. Cette lignée cellulaire a été créée par le NCI-Navy Medical Oncology Branch dans le cadre d'un effort global visant à générer des modèles de cancer du poumon cliniquement annotés pour la recherche et le développement thérapeutique. NCI-H322 présente une morphologie épithéliale adhérente in vitro et est généralement maintenue dans un milieu RPMI-1640 complété par 10 % de sérum bovin fœtal dans des conditions de culture cellulaire standard.

Le profilage moléculaire de NCI-H322 révèle qu'elle est porteuse d'une mutation KRAS, qui contribue à la signalisation oncogénique par les voies MAPK/ERK et PI3K/AKT. Cette mutation rend la lignée cellulaire résistante aux thérapies ciblant l'EGFR et la rend appropriée pour les études centrées sur l'adénocarcinome pulmonaire induit par KRAS. En outre, la lignée est de type sauvage pour l'EGFR et le TP53, ce qui offre un contexte génétique défini pour disséquer la biologie des tumeurs dépendantes de KRAS. Ses données transcriptionnelles et protéomiques ont été incluses dans des ensembles de données à grande échelle tels que l'encyclopédie des lignées cellulaires du cancer (CCLE), où elles ont contribué à l'analyse des vulnérabilités spécifiques à la lignée et des schémas de réponse aux médicaments.

NCI-H322 a été largement utilisé dans le cadre de criblages pharmacologiques et d'études mécanistiques afin d'explorer la sensibilité aux inhibiteurs de MEK, aux inhibiteurs de la voie PI3K et aux agents chimiothérapeutiques. Ses performances constantes d'une étude à l'autre et son profil mutationnel bien documenté en font un modèle préclinique précieux pour le CBNPC à mutation KRAS, ainsi qu'une référence clé dans les efforts visant à comprendre l'hétérogénéité tumorale et la résistance aux médicaments dans l'adénocarcinome du poumon.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie