Skip to content
NCI-H322
Tissue
Phổi
Disease
Ung thư phổi dạng tuyến xâm lấn tối thiểu
Synonyms
H322, H-322, H322T, NCI-H322T, NCIH322T, NCI-322, NCIH322

Documents

NCI-H322

Cell line · Product number 305839

NCI-H322 is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from an adult patient with a bronchioalveolar carcinoma, a histologic subtype of ...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

NCI-H322 là dòng tế bào ung thư phổi không phải tế bào nhỏ (NSCLC) của người, được phân lập từ một bệnh nhân trưởng thành mắc ung thư phế quản phế nang, một thể mô học của ung thư phổi dạng tuyến. Dòng tế bào này được thiết lập bởi Khoa Ung thư Huyết học của Viện Ung thư Quốc gia (NCI) và Hải quân Hoa Kỳ (Navy) như một phần của nỗ lực toàn diện nhằm tạo ra các mô hình ung thư phổi có chú thích lâm sàng cho nghiên cứu và phát triển điều trị. NCI-H322 có hình thái biểu mô bám dính trong ống nghiệm và thường được duy trì trong môi trường RPMI-1640 bổ sung 10% huyết thanh bò non dưới điều kiện nuôi cấy tế bào tiêu chuẩn.

Phân tích phân tử của NCI-H322 cho thấy dòng tế bào này mang đột biến KRAS, góp phần vào tín hiệu ung thư thông qua các con đường MAPK/ERK và PI3K/AKT. Đột biến này khiến dòng tế bào kháng lại các liệu pháp nhắm mục tiêu EGFR và phù hợp cho các nghiên cứu tập trung vào ung thư phổi adenocarcinoma do KRAS điều khiển. Ngoài ra, dòng tế bào này có kiểu gen hoang dã đối với EGFR và TP53, cung cấp một bối cảnh di truyền xác định để phân tích sinh học khối u phụ thuộc vào KRAS. Dữ liệu chuyển mã và protein của nó đã được bao gồm trong các bộ dữ liệu quy mô lớn như Bách khoa toàn thư về Dòng tế bào Ung thư (CCLE), nơi nó đã góp phần vào các phân tích về điểm yếu đặc trưng của dòng tế bào và mô hình phản ứng với thuốc.

NCI-H322 đã được sử dụng rộng rãi trong sàng lọc dược lý và các nghiên cứu cơ chế để khám phá độ nhạy cảm với các chất ức chế MEK, chất ức chế đường dẫn PI3K và các tác nhân hóa trị. Hiệu suất ổn định của nó trong các nghiên cứu và hồ sơ đột biến được ghi chép đầy đủ khiến nó trở thành một mô hình tiền lâm sàng quý giá cho ung thư phổi không tế bào nhỏ (NSCLC) có đột biến KRAS, cũng như một tham chiếu quan trọng trong nỗ lực hiểu về tính đa dạng của khối u và kháng thuốc trong ung thư phổi dạng tuyến.

Tissue
Phổi
Disease
Ung thư phổi dạng tuyến xâm lấn tối thiểu
Synonyms
  • H322
  • H-322
  • H322T
  • NCI-H322T
  • NCIH322T
  • NCI-322
  • NCIH322

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
Tế bào câu lạc bộ
Doubling time
50

04Identifiers

Citation
NCI-H322 (Số catalog Cytion 305839)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1556

05Expression and susceptibility

Mutational profile
Biến đổi gen: TP53, đơn giản, p.Arg248Leu (c.743G>T), đồng hợp tử (PubMed=1311061, PubMed=1565469, PubMed=10536175, PubMed=20557307).

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
52 năm
Ethnicity
Người da trắng