NCI-H322

NCI-H322 er en human ikke-småcellet lungekreftcellelinje (NSCLC) som stammer fra en voksen pasient med bronkioalveolært karsinom, en histologisk undertype av adenokarsinom. Denne cellelinjen ble etablert av NCI-Navy Medical Oncology Branch som en del av en omfattende innsats for å generere klinisk annoterte lungekreftmodeller for forskning og terapeutisk utvikling. NCI-H322 har en adherente epitelmorfologi in vitro og holdes vanligvis i RPMI-1640-medium supplert med 10 % føtalt bovint serum under standard cellekulturbetingelser.

Molekylær profilering av NCI-H322 viser at den bærer en KRAS-mutasjon, som bidrar til onkogen signalering gjennom MAPK/ERK- og PI3K/AKT-veiene. Denne mutasjonen gjør cellelinjen resistent mot EGFR-rettet behandling og gjør den egnet for studier med fokus på KRAS-drevet lungeadenokarsinom. I tillegg er cellelinjen villtype for EGFR og TP53, noe som gir en definert genetisk kontekst for dissekering av KRAS-avhengig tumorbiologi. Transkripsjons- og proteomdata fra linjen har blitt inkludert i store datasett som Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), der den har bidratt til analyser av linjespesifikke sårbarheter og responsmønstre på legemidler.

NCI-H322 har blitt brukt i utstrakt grad i farmakologisk screening og mekanistiske studier for å undersøke sensitivitet for MEK-hemmere, PI3K-hemmere og kjemoterapeutiske midler. NCI-H322 har konsistente resultater på tvers av studier og en veldokumentert mutasjonsprofil som gjør den til en verdifull preklinisk modell for KRAS-mutert NSCLC, samt en viktig referanse i arbeidet med å forstå tumorheterogenitet og legemiddelresistens i lungeadenokarsinom.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring