NCI-H322

NCI-H322 on ihmisen ei-pienisoluisen keuhkosyövän (NSCLC) solulinja, joka on peräisin aikuispotilaalta, jolla on bronkioalveolaarinen karsinooma, adenokarsinooman histologinen alatyyppi. Tämän solulinjan perusti NCI-Navy Medical Oncology Branch osana kattavaa pyrkimystä luoda kliinisesti merkittyjä keuhkosyöpämalleja tutkimusta ja terapeuttista kehitystä varten. NCI-H322:lla on tarttuva epiteelimorfologia in vitro, ja sitä ylläpidetään tavallisesti RPMI-1640-mediassa, jota on täydennetty 10 %:lla naudan sikiöseerumilla, tavanomaisissa soluviljelyolosuhteissa.

NCI-H322:n molekyyliprofilointi paljastaa, että siinä on KRAS-mutaatio, joka vaikuttaa onkogeeniseen signalointiin MAPK/ERK- ja PI3K/AKT-reittien kautta. Tämä mutaatio tekee solulinjasta vastustuskykyisen EGFR:ään kohdistuville hoidoille ja tekee siitä sopivan KRAS-ohjattuun keuhkojen adenokarsinoomaan keskittyviin tutkimuksiin. Lisäksi linja on villityyppinen EGFR:n ja TP53:n suhteen, mikä tarjoaa määritellyn geneettisen kontekstin KRAS-riippuvaisen kasvainbiologian selvittämiseksi. Sen transkriptio- ja proteomitiedot on sisällytetty laajamittaisiin tietokokonaisuuksiin, kuten Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) -tietokantaan, jossa se on osallistunut linjakohtaisten haavoittuvuuksien ja lääkevasteiden analysointiin.

NCI-H322:ta on käytetty laajasti farmakologisessa seulonnassa ja mekanistisissa tutkimuksissa, joissa on tutkittu herkkyyttä MEK:n estäjille, PI3K-reitin estäjille ja kemoterapeuttisille aineille. Sen johdonmukainen suorituskyky eri tutkimuksissa ja hyvin dokumentoitu mutaatioprofiili tekevät siitä arvokkaan prekliinisen mallin KRAS-mutanttien aiheuttamalle NSCLC:lle sekä keskeisen vertailukohteen pyrittäessä ymmärtämään kasvaimen heterogeenisuutta ja lääkeresistenssiä keuhkojen adenokarsinoomassa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa