Skip to content
NCI-H322
Tissue
ריאה
Disease
אדנוקרצינומה ריאתית פולשנית מינימלית
Synonyms
H322, H-322, H322T, NCI-H322T, NCIH322T, NCI-322, NCIH322

Documents

NCI-H322

Cell line · Product number 305839

NCI-H322 is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from an adult patient with a bronchioalveolar carcinoma, a histologic subtype of ...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

NCI-H322 הוא קו תאים של סרטן ריאות לא קטן (NSCLC) שמקורו בחולה בוגר עם קרצינומה ברונכיו-אלוולרית, תת-סוג היסטולוגי של אדנוקרצינומה. קו תאים זה הוקם על ידי NCI-Navy Medical Oncology Branch כחלק ממאמץ מקיף ליצירת מודלים של סרטן ריאות עם הערות קליניות למטרות מחקר ופיתוח טיפולי. NCI-H322 מציג מורפולוגיה אפיתלית דבקה במבחנה, והוא נשמר בדרך כלל במדיום RPMI-1640 בתוספת 10% סרום עגלי בתנאים סטנדרטיים של תרביות תאים.

פרופיל מולקולרי של NCI-H322 מגלה כי הוא נושא מוטציה KRAS, התורמת לאיתות אונקוגני דרך מסלולי MAPK/ERK ו-PI3K/AKT. מוטציה זו הופכת את קו התאים לעמיד לטיפולים המכוונים ל-EGFR והופכת אותו למתאים למחקרים המתמקדים באדנוקרצינומה ריאתית המונעת על ידי KRAS. בנוסף, הקו הוא מסוג wild-type עבור EGFR ו-TP53, ומציע הקשר גנטי מוגדר לניתוח הביולוגיה של גידולים התלויים ב-KRAS. נתוני השעתוק והפרוטאומיקה שלו נכללו במאגרי נתונים בקנה מידה גדול כגון Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), שם הם תרמו לניתוחים של נקודות תורפה ספציפיות לשושלת ותבניות תגובה לתרופות.

NCI-H322 שימש בהרחבה בבדיקות פרמקולוגיות ובמחקרים מכניים לבחינת הרגישות למעכבי MEK, מעכבי מסלול PI3K וסוכנים כימותרפיים. ביצועיו העקביים במחקרים ופרופיל המוטציות המתועד היטב הופכים אותו למודל פרה-קליני חשוב עבור NSCLC עם מוטציה ב-KRAS, וכן לנקודת התייחסות מרכזית במאמצים להבנת ההטרוגניות של הגידול ועמידותו לתרופות באדנוקרצינומה של הריאה.

Tissue
ריאה
Disease
אדנוקרצינומה ריאתית פולשנית מינימלית
Synonyms
  • H322
  • H-322
  • H322T
  • NCI-H322T
  • NCIH322T
  • NCI-322
  • NCIH322

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
תאי מועדון
Doubling time
50

04Identifiers

Citation
NCI-H322 (מספר קטלוגי Cytion 305839)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1556

05Expression and susceptibility

Mutational profile
מוטציה: TP53, פשוטה, p.Arg248Leu (c.743G>T), הומוזיגוטית (PubMed=1311061, PubMed=1565469, PubMed=10536175, PubMed=20557307).

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
52 שנים
Ethnicity
קווקזי