NCI-H322

Az NCI-H322 egy humán nem kissejtes tüdőrák (NSCLC) sejtvonal, amely egy felnőtt betegtől származik, aki bronchioalveoláris karcinómában, az adenokarcinóma egyik szövettani altípusában szenved. Ezt a sejtvonalat az NCI-Navy Medical Oncology Branch hozta létre annak az átfogó erőfeszítésnek a részeként, amelynek célja klinikailag jegyzetelt tüdőrákmodellek létrehozása a kutatás és a terápiás fejlesztés számára. Az NCI-H322 in vitro adherens epithelialis morfológiát mutat, és jellemzően 10% magzati szarvasmarha szérummal kiegészített RPMI-1640 táptalajon tartják standard sejttenyésztési körülmények között.

Az NCI-H322 molekuláris profiljának meghatározása azt mutatja, hogy KRAS-mutációt hordoz, amely hozzájárul a MAPK/ERK és PI3K/AKT útvonalakon keresztül történő onkogén jelátvitelhez. Ez a mutáció rezisztenssé teszi a sejtvonalat az EGFR-célzott terápiákkal szemben, és alkalmassá teszi a KRAS által vezérelt tüdő adenokarcinómára irányuló vizsgálatokra. Emellett a vonal vad EGFR- és TP53-típusú, ami meghatározott genetikai kontextust biztosít a KRAS-függő tumorbiológia feltárásához. Transzkripciós és proteomikai adatai bekerültek olyan nagyszabású adathalmazokba, mint például a Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), ahol hozzájárult a vonal-specifikus sebezhetőségek és a gyógyszerre adott válaszminták elemzéséhez.

Az NCI-H322-t széles körben használták farmakológiai szűrésekben és mechanisztikus vizsgálatokban a MEK-gátlókkal, PI3K-útvonal-gátlókkal és kemoterápiás szerekkel szembeni érzékenység feltárására. A vizsgálatokban nyújtott konzisztens teljesítménye és jól dokumentált mutációs profilja a KRAS-mutáns NSCLC értékes preklinikai modelljévé, valamint a tüdő adenokarcinóma tumorheterogenitásának és gyógyszerrezisztenciájának megértésére irányuló erőfeszítések kulcsfontosságú referenciájává teszi.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban