NCI-H322

NCI-H322 è una linea cellulare umana di carcinoma polmonare non a piccole cellule (NSCLC) derivata da un paziente adulto con un carcinoma bronchioalveolare, un sottotipo istologico di adenocarcinoma. Questa linea cellulare è stata creata dall'NCI-Navy Medical Oncology Branch come parte di uno sforzo globale per generare modelli di cancro al polmone clinicamente annotati per la ricerca e lo sviluppo terapeutico. La NCI-H322 presenta una morfologia epiteliale aderente in vitro ed è tipicamente mantenuta in terreno RPMI-1640 integrato con il 10% di siero fetale bovino in condizioni di coltura cellulare standard.

Il profilo molecolare di NCI-H322 rivela che è portatore di una mutazione KRAS, che contribuisce alla segnalazione oncogenica attraverso le vie MAPK/ERK e PI3K/AKT. Questa mutazione rende la linea cellulare resistente alle terapie mirate all'EGFR e la rende adatta a studi incentrati sull'adenocarcinoma polmonare KRAS-driven. Inoltre, la linea è wild-type per EGFR e TP53, offrendo un contesto genetico definito per analizzare la biologia tumorale KRAS-dipendente. I suoi dati trascrizionali e proteomici sono stati inclusi in set di dati su larga scala come la Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), dove hanno contribuito all'analisi delle vulnerabilità specifiche della linea e dei modelli di risposta ai farmaci.

NCI-H322 è stato ampiamente utilizzato in studi di screening farmacologico e meccanicistico per esplorare la sensibilità agli inibitori di MEK, agli inibitori della via PI3K e agli agenti chemioterapici. Le sue prestazioni costanti in tutti gli studi e il profilo di mutazioni ben documentato ne fanno un modello preclinico prezioso per il NSCLC KRAS-mutante, oltre che un riferimento fondamentale negli sforzi per comprendere l'eterogeneità tumorale e la resistenza ai farmaci nell'adenocarcinoma polmonare.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia