NCI-H322

NCI-H322 je lidská buněčná linie nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC) odvozená od dospělého pacienta s bronchioalveolárním karcinomem, což je histologický podtyp adenokarcinomu. Tato buněčná linie byla vytvořena oddělením lékařské onkologie NCI-Navy v rámci komplexního úsilí o vytvoření klinicky anotovaných modelů karcinomu plic pro výzkum a vývoj léčebných postupů. NCI-H322 vykazuje adherentní epiteliální morfologii in vitro a obvykle se udržuje v médiu RPMI-1640 doplněném 10% fetálním hovězím sérem za standardních podmínek kultivace buněk.

Molekulární profilování NCI-H322 ukazuje, že je nositelem mutace KRAS, která přispívá k onkogenní signalizaci prostřednictvím drah MAPK/ERK a PI3K/AKT. Tato mutace činí buněčnou linii rezistentní vůči terapii cílené na EGFR a je vhodná pro studie zaměřené na plicní adenokarcinom řízený KRAS. Kromě toho je tato linie divokého typu pro EGFR a TP53, což nabízí definovaný genetický kontext pro zkoumání biologie nádorů závislých na KRAS. Její transkripční a proteomické údaje byly zahrnuty do rozsáhlých souborů dat, jako je Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), kde přispěla k analýzám zranitelnosti specifické pro danou linii a vzorců odpovědi na léčiva.

NCI-H322 byla hojně využívána ve farmakologickém screeningu a mechanistických studiích ke zkoumání citlivosti na inhibitory MEK, inhibitory dráhy PI3K a chemoterapeutika. Jeho konzistentní výkonnost napříč studiemi a dobře zdokumentovaný mutační profil z něj činí cenný preklinický model pro NSCLC s mutací KRAS a také klíčovou referenci v úsilí o pochopení heterogenity nádorů a rezistence na léky u plicního adenokarcinomu.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení