Pāriet uz saturu
NCI-H322
Audums
Plaušas
Slimība
Minimāli invazīva plaušu adenokarcinoma
Sinonīmi
H322, H-322, H322T, NCI-H322T, NCIH322T, NCI-322, NCIH322

Dokumenti

NCI-H322

Cell line · Preces numurs 305839

NCI-H322 is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from an adult patient with a bronchioalveolar carcinoma, a histologic subtype of ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCI-H322 ir cilvēka nesmalikocelulārā plaušu vēža (NSCLC) šūnu līnija, kas iegūta no pieauguša pacienta ar bronhiolārijas karcinomu, kas ir adenokarcinomas histoloģiskais apakštips. Šo šūnu līniju izveidoja NCI un Jūras kara flotes Medicīniskās onkoloģijas filiāle kā daļu no visaptverošiem centieniem radīt klīniski anotētus plaušu vēža modeļus pētniecībai un terapijas izstrādei. NCI-H322 in vitro uzrāda adherētu epitēlija morfoloģiju un parasti tiek uzturēta RPMI-1640 barotnē, kas papildināta ar 10 % fetālā liellopu seruma standarta šūnu kultūras apstākļos.

NCI-H322 molekulārā profilēšana atklāj, ka tajā ir KRAS mutācija, kas veicina onkogēno signalizāciju, izmantojot MAPK/ERK un PI3K/AKT ceļus. Šī mutācija padara šūnu līniju rezistentu pret EGFR mērķētu terapiju un padara to piemērotu pētījumiem, kas vērsti uz KRAS izraisītu plaušu adenokarcinomu. Turklāt šī līnija ir EGFR un TP53 savvaļas tipa, kas nodrošina noteiktu ģenētisko kontekstu KRAS atkarīgu audzēju bioloģijas izpētei. Tās transkripcijas un proteomikas dati ir iekļauti plaša mēroga datu kopās, piemēram, Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), kur tā ir palīdzējusi analizēt līnijai raksturīgo ievainojamību un reakcijas uz zālēm modeļus.

NCI-H322 ir plaši izmantots farmakoloģiskajā skrīningā un mehānistiskajos pētījumos, lai izpētītu jutību pret MEK inhibitoriem, PI3K ceļa inhibitoriem un ķīmijterapijas līdzekļiem. Tā konsekventā veiktspēja dažādos pētījumos un labi dokumentētais mutāciju profils padara to par vērtīgu KRAS-mutantu NSCLC preklīnisko modeli, kā arī par galveno references paraugu, lai izprastu plaušu adenokarcinomas audzēju heterogenitāti un rezistenci pret zālēm.

Audums
Plaušas
Slimība
Minimāli invazīva plaušu adenokarcinoma
Sinonīmi
  • H322
  • H-322
  • H322T
  • NCI-H322T
  • NCIH322T
  • NCI-322
  • NCIH322

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Kluba šūnas
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
50

04Identifikatori

Atsauce
NCI-H322 (Cytion kataloga numurs 305839)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1556

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: TP53, vienkārša, p.Arg248Leu (c.743G>T), homozigotiska (PubMed=1311061, PubMed=1565469, PubMed=10536175, PubMed=20557307).

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
52 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis