Ga naar de inhoud
NCI-H322
Weefsel
Long
Ziekte
Minimaal invasief longadenocarcinoom
Synoniemen
H322, H-322, H322T, NCI-H322T, NCIH322T, NCI-322, NCIH322

Documenten

NCI-H322

Cell line · Productnummer 305839

NCI-H322 is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from an adult patient with a bronchioalveolar carcinoma, a histologic subtype of ...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

NCI-H322 is een humane niet-kleincellige longkanker (NSCLC) cellijn afkomstig van een volwassen patiënt met een bronchioalveolair carcinoom, een histologisch subtype van adenocarcinoom. Deze cellijn is opgezet door de NCI-Navy Medical Oncology Branch als onderdeel van een uitgebreide inspanning om klinisch geannoteerde longkankermodellen te genereren voor onderzoek en therapeutische ontwikkeling. NCI-H322 vertoont een adherente epitheliale morfologie in vitro en wordt doorgaans gehandhaafd in RPMI-1640-medium aangevuld met 10% foetaal runderserum onder standaard celkweekomstandigheden.

Moleculaire profilering van NCI-H322 laat zien dat het drager is van een KRAS-mutatie, die bijdraagt aan oncogene signalering via de MAPK/ERK- en PI3K/AKT-routes. Deze mutatie maakt de cellijn resistent tegen EGFR-gerichte therapieën en geschikt voor onderzoek naar KRAS-gedreven longadenocarcinoom. Daarnaast is de lijn wild-type voor EGFR en TP53, wat een gedefinieerde genetische context biedt voor het ontleden van KRAS-afhankelijke tumorbiologie. De transcriptionele en proteomische gegevens zijn opgenomen in grootschalige datasets zoals de Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), waar ze hebben bijgedragen aan analyses van lijnspecifieke kwetsbaarheden en geneesmiddelenresponspatronen.

NCI-H322 is uitgebreid gebruikt in farmacologische screening en mechanistische studies om de gevoeligheid voor MEK-remmers, PI3K-remmers en chemotherapeutische middelen te onderzoeken. Door de consistente prestaties in verschillende onderzoeken en het goed gedocumenteerde mutatieprofiel is het een waardevol preklinisch model voor KRAS-mutant NSCLC en een belangrijke referentie in pogingen om tumorheterogeniteit en geneesmiddelenresistentie in longadenocarcinoom te begrijpen.

Weefsel
Long
Ziekte
Minimaal invasief longadenocarcinoom
Synoniemen
  • H322
  • H-322
  • H322T
  • NCI-H322T
  • NCIH322T
  • NCI-322
  • NCIH322

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Celtype
Clubs
Verdubbelingstijd
50

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NCI-H322 (Cytion catalogusnummer 305839)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1556

05Expressie en vatbaarheid

Mutatieprofiel
Mutatie: TP53, eenvoudig, p.Arg248Leu (c.743G>T), homozygoot (PubMed=1311061, PubMed=1565469, PubMed=10536175, PubMed=20557307).

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
52 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch