NCI-H322

Η NCI-H322 είναι μια ανθρώπινη κυτταρική σειρά μη μικροκυτταρικού καρκίνου του πνεύμονα (NSCLC) που προέρχεται από ενήλικα ασθενή με βρογχοκυψελιδικό καρκίνωμα, έναν ιστολογικό υπότυπο αδενοκαρκινώματος. Αυτή η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε από τον κλάδο ιατρικής ογκολογίας του NCI-Navy ως μέρος μιας συνολικής προσπάθειας για τη δημιουργία κλινικά σχολιασμένων μοντέλων καρκίνου του πνεύμονα για την έρευνα και τη θεραπευτική ανάπτυξη. Το NCI-H322 παρουσιάζει προσκολλημένη επιθηλιακή μορφολογία in vitro και συνήθως διατηρείται σε μέσο RPMI-1640 συμπληρωμένο με 10% εμβρυϊκό ορό βοοειδών υπό τυπικές συνθήκες κυτταροκαλλιέργειας.

Η μοριακή σκιαγράφηση του NCI-H322 αποκαλύπτει ότι φέρει μετάλλαξη KRAS, η οποία συμβάλλει στην ογκογόνο σηματοδότηση μέσω των μονοπατιών MAPK/ERK και PI3K/AKT. Η μετάλλαξη αυτή καθιστά την κυτταρική σειρά ανθεκτική στις θεραπείες που στοχεύουν στον EGFR και την καθιστά κατάλληλη για μελέτες που επικεντρώνονται στο αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα που οφείλεται στο KRAS. Επιπλέον, η σειρά είναι άγριου τύπου για τον EGFR και το TP53, προσφέροντας ένα καθορισμένο γενετικό πλαίσιο για την ανάλυση της βιολογίας των όγκων που εξαρτώνται από το KRAS. Τα μεταγραφικά και πρωτεομικά δεδομένα της έχουν συμπεριληφθεί σε σύνολα δεδομένων μεγάλης κλίμακας, όπως η εγκυκλοπαίδεια καρκινικών κυτταρικών γραμμών (Cancer Cell Line Encyclopedia - CCLE), όπου έχει συμβάλει σε αναλύσεις των ειδικών ευπαθειών της γραμμής και των μοτίβων απόκρισης στα φάρμακα.

Το NCI-H322 έχει χρησιμοποιηθεί εκτενώς σε φαρμακολογική διαλογή και μηχανιστικές μελέτες για τη διερεύνηση της ευαισθησίας σε αναστολείς της MEK, αναστολείς της οδού PI3K και χημειοθεραπευτικούς παράγοντες. Η συνεπής απόδοσή του σε όλες τις μελέτες και το καλά τεκμηριωμένο προφίλ μεταλλάξεων το καθιστούν ένα πολύτιμο προκλινικό μοντέλο για τον μεταλλαγμένο κατά KRAS NSCLC, καθώς και ένα βασικό σημείο αναφοράς στις προσπάθειες κατανόησης της ετερογένειας του όγκου και της αντίστασης στα φάρμακα στο αδενοκαρκίνωμα του πνεύμονα.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης