NCI-H322

A NCI-H322 é uma linha celular humana de cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC) derivada de um doente adulto com um carcinoma bronquioalveolar, um subtipo histológico de adenocarcinoma. Esta linha celular foi criada pelo NCI-Navy Medical Oncology Branch como parte de um esforço abrangente para gerar modelos de cancro do pulmão clinicamente anotados para investigação e desenvolvimento terapêutico. A NCI-H322 apresenta uma morfologia epitelial aderente in vitro e é normalmente mantida em meio RPMI-1640 suplementado com 10% de soro fetal bovino em condições normais de cultura de células.

O perfil molecular da linhagem NCI-H322 revela que esta é portadora de uma mutação KRAS, que contribui para a sinalização oncogénica através das vias MAPK/ERK e PI3K/AKT. Esta mutação torna a linha celular resistente a terapias direcionadas para o EGFR e torna-a adequada para estudos centrados no adenocarcinoma do pulmão com KRAS. Além disso, a linha é do tipo selvagem para EGFR e TP53, oferecendo um contexto genético definido para dissecar a biologia tumoral dependente de KRAS. Os seus dados transcricionais e proteómicos foram incluídos em conjuntos de dados de grande escala, como a Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), onde contribuiu para a análise das vulnerabilidades específicas da linhagem e dos padrões de resposta aos medicamentos.

A linhagem NCI-H322 tem sido amplamente utilizada no rastreio farmacológico e em estudos mecanicistas para explorar a sensibilidade aos inibidores da MEK, aos inibidores da via PI3K e aos agentes quimioterapêuticos. O seu desempenho consistente em todos os estudos e o perfil de mutações bem documentado fazem dele um modelo pré-clínico valioso para o CPNPC com mutações KRAS, bem como uma referência fundamental nos esforços para compreender a heterogeneidade tumoral e a resistência aos medicamentos no adenocarcinoma do pulmão.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia