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NCI-H322
Gewebe
Lunge
Krankheit
Minimalinvasives Adenokarzinom der Lunge
Synonyme
H322, H-322, H322T, NCI-H322T, NCIH322T, NCI-322, NCIH322

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NCI-H322

Cell line · Artikelnummer 305839

NCI-H322 is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from an adult patient with a bronchioalveolar carcinoma, a histologic subtype of ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

NCI-H322 ist eine menschliche Zelllinie für nicht-kleinzelligen Lungenkrebs (NSCLC), die von einem erwachsenen Patienten mit einem bronchioalveolären Karzinom, einem histologischen Subtyp des Adenokarzinoms, stammt. Diese Zelllinie wurde von der NCI-Navy Medical Oncology Branch im Rahmen eines umfassenden Projekts zur Entwicklung von klinischen Lungenkrebsmodellen für die Forschung und therapeutische Entwicklung entwickelt. NCI-H322 zeigt in vitro eine adhärente epitheliale Morphologie und wird in der Regel in RPMI-1640-Medium mit 10 % fötalem Rinderserum unter Standardzellkulturbedingungen gehalten.

Die molekulare Profilierung von NCI-H322 zeigt, dass sie eine KRAS-Mutation trägt, die zur onkogenen Signalübertragung über die MAPK/ERK- und PI3K/AKT-Signalwege beiträgt. Diese Mutation macht die Zelllinie resistent gegen EGFR-gerichtete Therapien und macht sie geeignet für Studien, die sich auf KRAS-gesteuerte Lungenadenokarzinome konzentrieren. Darüber hinaus ist die Linie Wildtyp für EGFR und TP53 und bietet damit einen definierten genetischen Kontext für die Untersuchung der KRAS-abhängigen Tumorbiologie. Ihre Transkriptions- und Proteomdaten wurden in groß angelegte Datensätze wie die Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) aufgenommen, wo sie zur Analyse von stammesspezifischen Schwachstellen und Ansprechmustern auf Medikamente beigetragen hat.

NCI-H322 wurde ausgiebig in pharmakologischen Screenings und mechanistischen Studien eingesetzt, um die Empfindlichkeit gegenüber MEK-Inhibitoren, PI3K-Signalweg-Inhibitoren und Chemotherapeutika zu untersuchen. Seine konsistente Leistung in allen Studien und sein gut dokumentiertes Mutationsprofil machen es zu einem wertvollen präklinischen Modell für KRAS-mutierten NSCLC sowie zu einer wichtigen Referenz bei den Bemühungen, die Tumorheterogenität und Arzneimittelresistenz bei Lungenadenokarzinomen zu verstehen.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Minimalinvasives Adenokarzinom der Lunge
Synonyme
  • H322
  • H-322
  • H322T
  • NCI-H322T
  • NCIH322T
  • NCI-322
  • NCIH322

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Zelltyp
Clubzellen
Verdopplungszeit
50

04Bezeichner

Quellenangabe
NCI-H322 (Cytion-Katalognummer 305839)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1556

05Expression und Anfälligkeit

Mutationsprofil
Mutation: TP53, Einfach, p.Arg248Leu (c.743G>T), Homozygot (PubMed=1311061, PubMed=1565469, PubMed=10536175, PubMed=20557307).

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
52 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch