NCI-H322

NCI-H322 to ludzka linia komórkowa niedrobnokomórkowego raka płuc (NSCLC) pochodząca od dorosłego pacjenta z rakiem oskrzelowo-pęcherzykowym, histologicznym podtypem gruczolakoraka. Ta linia komórkowa została utworzona przez NCI-Navy Medical Oncology Branch w ramach kompleksowych działań mających na celu stworzenie klinicznie opisanych modeli raka płuc do badań i rozwoju terapeutycznego. NCI-H322 wykazuje przylegającą morfologię nabłonka in vitro i jest zwykle utrzymywany w pożywce RPMI-1640 uzupełnionej 10% płodową surowicą bydlęcą w standardowych warunkach hodowli komórkowej.

Profilowanie molekularne NCI-H322 ujawnia, że jest on nosicielem mutacji KRAS, która przyczynia się do sygnalizacji onkogennej poprzez szlaki MAPK/ERK i PI3K/AKT. Mutacja ta sprawia, że linia komórkowa jest odporna na terapie ukierunkowane na EGFR i nadaje się do badań nad gruczolakorakiem płuc wywołanym przez KRAS. Dodatkowo, linia ta jest dzika dla EGFR i TP53, oferując zdefiniowany kontekst genetyczny do analizy biologii nowotworów zależnych od KRAS. Jej dane transkrypcyjne i proteomiczne zostały włączone do dużych zbiorów danych, takich jak Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), gdzie przyczyniły się do analizy podatności specyficznych dla linii i wzorców odpowiedzi na leki.

NCI-H322 był szeroko stosowany w farmakologicznych badaniach przesiewowych i badaniach mechanistycznych w celu zbadania wrażliwości na inhibitory MEK, inhibitory szlaku PI3K i środki chemioterapeutyczne. Jego spójna wydajność we wszystkich badaniach i dobrze udokumentowany profil mutacji sprawiają, że jest to cenny model przedkliniczny dla NSCLC z mutacją KRAS, a także kluczowy punkt odniesienia w wysiłkach na rzecz zrozumienia heterogeniczności guza i oporności na leki w gruczolakoraku płuc.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym