NCI-H322

NCI-H322 es una línea celular humana de cáncer de pulmón no microcítico (CPNM) derivada de un paciente adulto con un carcinoma bronquioalveolar, un subtipo histológico de adenocarcinoma. Esta línea celular fue establecida por la Subdivisión de Oncología Médica del NCI-Navy como parte de un esfuerzo integral para generar modelos de cáncer de pulmón clínicamente anotados para la investigación y el desarrollo terapéutico. NCI-H322 presenta una morfología epitelial adherente in vitro y se mantiene normalmente en medio RPMI-1640 suplementado con un 10% de suero bovino fetal en condiciones de cultivo celular estándar.

El perfil molecular de NCI-H322 revela que es portadora de una mutación KRAS, que contribuye a la señalización oncogénica a través de las vías MAPK/ERK y PI3K/AKT. Esta mutación hace que la línea celular sea resistente a las terapias dirigidas contra el EGFR y la hace adecuada para estudios centrados en el adenocarcinoma de pulmón inducido por KRAS. Además, la línea es de tipo salvaje para EGFR y TP53, lo que ofrece un contexto genético definido para diseccionar la biología tumoral dependiente de KRAS. Sus datos transcripcionales y proteómicos se han incluido en conjuntos de datos a gran escala como la Enciclopedia de Líneas Celulares de Cáncer (CCLE), donde ha contribuido al análisis de vulnerabilidades específicas de linaje y patrones de respuesta a fármacos.

NCI-H322 se ha utilizado ampliamente en estudios de cribado farmacológico y mecanísticos para explorar la sensibilidad a inhibidores de MEK, inhibidores de la vía PI3K y agentes quimioterapéuticos. Su rendimiento constante en todos los estudios y su perfil de mutaciones bien documentado lo convierten en un valioso modelo preclínico para el CPNM con mutación de KRAS, así como en una referencia clave en los esfuerzos por comprender la heterogeneidad tumoral y la resistencia a fármacos en el adenocarcinoma de pulmón.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía