NCI-H322

NCI-H322 je ľudská bunková línia nemalobunkového karcinómu pľúc (NSCLC) odvodená od dospelého pacienta s bronchioalveolárnym karcinómom, histologickým podtypom adenokarcinómu. Túto bunkovú líniu vytvorilo oddelenie NCI-Navy Medical Oncology Branch v rámci komplexného úsilia o vytvorenie klinicky anotovaných modelov rakoviny pľúc na účely výskumu a vývoja liečby. NCI-H322 vykazuje adherentnú epitelovú morfológiu in vitro a zvyčajne sa udržiava v médiu RPMI-1640 doplnenom 10 % fetálneho hovädzieho séra za štandardných podmienok kultivácie buniek.

Molekulárne profilovanie NCI-H322 odhaľuje, že nesie mutáciu KRAS, ktorá prispieva k onkogénnej signalizácii prostredníctvom dráh MAPK/ERK a PI3K/AKT. Táto mutácia spôsobuje, že bunková línia je rezistentná voči terapiám cieleným na EGFR a je vhodná na štúdie zamerané na adenokarcinóm pľúc spôsobený KRAS. Okrem toho je táto línia divokého typu pre EGFR a TP53, čo ponúka definovaný genetický kontext na rozbor nádorovej biológie závislej od KRAS. Jej transkripčné a proteomické údaje boli zahrnuté do rozsiahlych súborov údajov, ako je napríklad encyklopédia rakovinových bunkových línií (Cancer Cell Line Encyclopedia - CCLE), kde prispela k analýzam zraniteľnosti špecifickej pre danú líniu a vzorcov reakcie na lieky.

NCI-H322 sa vo veľkej miere využíva vo farmakologickom skríningu a mechanistických štúdiách na skúmanie citlivosti na inhibítory MEK, inhibítory dráhy PI3K a chemoterapeutiká. Jeho konzistentná výkonnosť vo všetkých štúdiách a dobre zdokumentovaný mutačný profil z neho robia cenný predklinický model pre NSCLC s mutáciou KRAS, ako aj kľúčovú referenciu v úsilí o pochopenie heterogenity nádoru a rezistencie na lieky v adenokarcinóme pľúc.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke