NCI-H322

La lignée cellulaire NCI-H322 est une lignée cellulaire humaine de cancer du poumon à cellules non petites (CPNCP) dérivée d’un patient adulte atteint d’un carcinome bronchio-alvéolaire, un sous-type histologique de l’adénocarcinome. Cette lignée cellulaire a été établie par la Division d’oncologie médicale du NCI-Navy dans le cadre d’un effort global visant à générer des modèles de cancer du poumon annotés cliniquement à des fins de recherche et de développement thérapeutique. La lignée NCI-H322 présente une morphologie épithéliale adhérente in vitro et est généralement cultivée dans un milieu RPMI-1640 enrichi de 10 % de sérum fœtal bovin, dans des conditions standard de culture cellulaire.

Le profilage moléculaire de la lignée NCI-H322 révèle qu’elle porte une mutation du gène KRAS, qui contribue à la signalisation oncogénique par l’intermédiaire des voies MAPK/ERK et PI3K/AKT. Cette mutation rend la lignée cellulaire résistante aux thérapies ciblant l’EGFR et la rend appropriée pour des études axées sur l’adénocarcinome pulmonaire induit par KRAS. De plus, la lignée est de type sauvage pour l’EGFR et le gène TP53, offrant ainsi un contexte génétique bien défini pour l’analyse de la biologie tumorale dépendante de KRAS. Ses données transcriptionnelles et protéomiques ont été intégrées à des ensembles de données à grande échelle tels que la Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), où elles ont contribué à l’analyse des vulnérabilités spécifiques à la lignée cellulaire et des profils de réponse aux médicaments.

La lignée NCI-H322 a été largement utilisée dans le criblage pharmacologique et les études mécanistiques pour explorer la sensibilité aux inhibiteurs de MEK, aux inhibiteurs de la voie PI3K et aux agents chimiothérapeutiques. Ses performances constantes d’une étude à l’autre et son profil de mutations bien documenté en font un modèle préclinique précieux pour le CPNPC présentant une mutation du gène KRAS, ainsi qu’une référence clé dans les efforts visant à comprendre l’hétérogénéité tumorale et la résistance aux médicaments dans l’adénocarcinome du poumon.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.