Mine otse sisu juurde
NCI-H322
Kude
Kopsud
Haigus
Minimaalselt invasiivne kopsu adenokartsinoom
Sünonüümid
H322, H-322, H322T, NCI-H322T, NCIH322T, NCI-322, NCIH322

Dokumendid

NCI-H322

Cell line · Toote number 305839

NCI-H322 is a human non-small cell lung cancer (NSCLC) cell line derived from an adult patient with a bronchioalveolar carcinoma, a histologic subtype of ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NCI-H322 on inimese mitteväikerakk-kopsuvähi (NSCLC) rakuliin, mis on saadud täiskasvanud patsiendilt, kellel on bronkoalveolaarne kartsinoom, mis on adenokartsinoomi histoloogiline alatüüp. See rakuliin loodi NCI-Navy Medical Oncology Branch'i poolt osana laiaulatuslikest jõupingutustest kliiniliselt kommenteeritud kopsuvähi mudelite loomiseks teadusuuringuteks ja raviarenduseks. NCI-H322 omab in vitro adherentset epiteeli morfoloogiat ja seda hoitakse tavaliselt RPMI-1640 keskkonnas, millele on lisatud 10% veiste loote seerumit, standardsetes rakukultuuritingimustes.

NCI-H322 molekulaarsest profiilianalüüsist selgub, et see kannab KRAS-mutatsioone, mis aitavad kaasa onkogeensele signalisatsioonile MAPK/ERK ja PI3K/AKT radade kaudu. See mutatsioon muudab rakuliini resistentseks EGFR-ile suunatud ravimeetodite suhtes ja muudab selle sobivaks KRAS-juhitud kopsu adenokartsinoomi uuringuteks. Lisaks sellele on see liin EGFRi ja TP53 suhtes metsikut tüüpi, mis pakub kindlat geneetilist konteksti KRASist sõltuva kasvaja bioloogia uurimiseks. Selle transkriptsiooni- ja proteoomilised andmed on lisatud sellistesse ulatuslikesse andmekogumitesse nagu Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), kus see on aidanud kaasa liinispetsiifiliste haavatavuste ja ravimivastuse mustrite analüüsidele.

NCI-H322 on laialdaselt kasutatud farmakoloogilises skriiningus ja mehhanistilistes uuringutes, et uurida tundlikkust MEK-inhibiitorite, PI3K-radu inhibiitorite ja kemoterapeutiliste ainete suhtes. Selle järjepidevad tulemused erinevates uuringutes ja hästi dokumenteeritud mutatsiooniprofiil teevad sellest väärtusliku prekliinilise mudeli KRAS-mutantidega NSCLC jaoks ning samuti olulise võrdlusmudeli, mis aitab mõista kasvaja heterogeensust ja ravimiresistentsust kopsu adenokartsinoomil.

Kude
Kopsud
Haigus
Minimaalselt invasiivne kopsu adenokartsinoom
Sünonüümid
  • H322
  • H-322
  • H322T
  • NCI-H322T
  • NCIH322T
  • NCI-322
  • NCIH322

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Klubi rakud
Kahekordistumisaeg
50

04Tunnused

Viide
NCI-H322 (Cytioni katalooginumber 305839)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1556

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: TP53, Simple, p.Arg248Leu (c.743G>T), homosügootne (PubMed=1311061, PubMed=1565469, PubMed=10536175, PubMed=20557307).

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
52 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia