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O-342
Tissu
Ovaire
Maladie
Adénocarcinome

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O-342

Cell line · Référence du produit 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

€800.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire O-342 est dérivée d'une tumeur ovarienne de rat et est largement utilisée dans la recherche sur le cancer, en particulier dans les études axées sur le cancer de l'ovaire et la résistance à la chimiothérapie. Cette lignée cellulaire se caractérise par sa capacité à se développer en monocouche et à entrer en phase de croissance logarithmique environ 24 heures après l'ensemencement, avec un temps de doublement de la population cellulaire d'environ 24 heures. La lignée cellulaire O-342 sert de lignée parentale à plusieurs sous-lignées, notamment la sous-lignée O-342/DDP résistante au cisplatine, qui a été développée par augmentation progressive des concentrations de cisplatine in vitro.

Les cellules O-342 présentent une hétéroploïdie dans leur structure chromosomique, ce qui contraste avec le caryotype quasi diploïde observé dans la sous-lignée O-342/DDP. Ce changement caryotypique est révélateur de la pression sélective exercée par une exposition continue au cisplatine, qui élimine la sous-population sensible au cisplatine, entraînant la prédominance de cellules résistantes. Des analyses biochimiques ont montré que les cellules O-342/DDP possèdent une résistance au cisplatine 33 fois supérieure à celle des cellules parentales O-342. Cette résistance se reflète dans les valeurs ID50, les cellules O-342/DDP ayant une ID50 de 33 μM contre 1 μM pour les cellules O-342.

D'autres études ont révélé que les cellules O-342/DDP présentent des niveaux intracellulaires de glutathion total (GSH+GSSG) significativement plus élevés, à 3,04 nmol/106 cellules, contre 1,37 nmol/106 cellules dans les cellules O-342. L'augmentation des niveaux de glutathion est associée à une amélioration des capacités de détoxification, contribuant à la chimiorésistance observée dans les cellules O-342/DDP. De plus, après un traitement au cisplatine, les liaisons transversales entre brins d'ADN et les cassures simple brin sont nettement plus élevées dans les cellules parentales O-342 que dans les cellules résistantes O-342/DDP, ce qui indique une capacité de réparation de l'ADN accrue dans la sous-lignée résistante.

Dans l'ensemble, la lignée cellulaire O-342, ainsi que sa sous-lignée O-342/DDP résistante au cisplatine, constituent un modèle robuste pour étudier les mécanismes de chimiorésistance dans le cancer de l'ovaire. Ces lignées cellulaires sont précieuses pour identifier des cibles thérapeutiques potentielles et développer des stratégies visant à surmonter la résistance à la chimiothérapie, améliorant ainsi les résultats du traitement pour les patientes atteintes d'un cancer de l'ovaire.

Tissu
Ovaire
Maladie
Adénocarcinome

02Classification

Organisme
Rat
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial

04Identifiants

Référence
O-342 (numéro de catalogue 500305 de Cytion)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5847

05Manipulation et culture

Milieu de culture
EMEM (MEM Eagle), w : 2 mM L-Glutamine, w : 2.2 g/L NaHCO3, w : EBSS (numéro d'article Cytion 820100a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

07Donateur

Race / sous-espèce
BDIx