الانتقال إلى المحتوى
O-342
الأنسجة
المبيض
المرض
السرطان الغدي

المستندات

O-342

Cell line · رقم المنتج 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

سلسلة الخلايا O-342 مشتقة من ورم مبيض الفئران وتستخدم على نطاق واسع في أبحاث السرطان، لا سيما في الدراسات التي تركز على سرطان المبيض ومقاومة العلاج الكيميائي. تتميز سلسلة الخلايا هذه بقدرتها على النمو في طبقة أحادية والدخول في مرحلة النمو اللوغاريتمي بعد حوالي 24 ساعة من البذر، مع تضاعف عدد الخلايا في غضون 24 ساعة تقريبًا. يعمل خط الخلايا O-342 كخط أبوي لعدة خطوط فرعية، بما في ذلك الخط الفرعي O-342/DDP المقاوم للسيسبلاتين، والذي تم تطويره من خلال الزيادة التدريجية لتركيزات السيسبلاتين في المختبر.

تُظهر خلايا O-342 تباينًا في بنية الكروموسومات، وهو ما يتناقض مع النمط النووي شبه الثنائي الملحوظ في الخط الفرعي O-342/DDP. يشير هذا التغيير في النمط النووي إلى الضغط الانتقائي الذي يمارسه التعرض المستمر للسيسبلاتين، والذي يقضي على المجموعة الفرعية الحساسة للسيسبلاتين، مما يؤدي إلى هيمنة الخلايا المقاومة. أظهرت التحليلات البيوكيميائية أن خلايا O-342/DDP تمتلك مقاومة للسيبلاتين أعلى بـ 33 ضعفًا مقارنة بخلايا O-342 الأصلية. تنعكس هذه المقاومة في قيم ID50، حيث تبلغ قيمة ID50 لخلايا O-342/DDP 33 ميكرومتر مقارنة بـ 1 ميكرومتر في خلايا O-342.

كشفت دراسات أخرى أن خلايا O-342/DDP تحتوي على مستويات أعلى بكثير من الجلوتاثيون الكلي داخل الخلايا (GSH+GSSG) عند 3.04 نانومول/106 خلية، مقارنة بـ 1.37 نانومول/106 خلية في خلايا O-342. يرتبط ارتفاع مستويات الجلوتاثيون بقدرات إزالة السموم المعززة، مما يساهم في مقاومة العلاج الكيميائي التي لوحظت في خلايا O-342/DDP. بالإضافة إلى ذلك، بعد العلاج بالسيبلاتين، تكون الروابط المتقاطعة بين سلاسل الحمض النووي والكسور أحادية السلسلة أعلى بشكل ملحوظ في خلايا O-342 الأصلية مقارنة بخلايا O-342/DDP المقاومة، مما يشير إلى زيادة قدرة إصلاح الحمض النووي في السلالة الفرعية المقاومة.

بشكل عام، توفر سلالة الخلايا O-342، إلى جانب سلالتها الفرعية المقاومة للسيسبلاتين O-342/DDP، نموذجًا قويًا لدراسة آليات مقاومة العلاج الكيميائي في سرطان المبيض. هذه السلالات الخلوية لا تقدر بثمن في تحديد الأهداف العلاجية المحتملة ووضع استراتيجيات للتغلب على مقاومة العلاج الكيميائي، وبالتالي تحسين نتائج العلاج لمرضى سرطان المبيض.

الأنسجة
المبيض
المرض
السرطان الغدي

02التصنيف

كائن حي
الجرذ
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة

04المعرّفات

المرجع
O-342 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 500305)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10116
سيلوصور
CVCL_5847

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

السلالة / النوع الفرعي
BDIx