Prejsť na obsah
O-342
Tkanivo
Vaječník
Choroba
Adenokarcinóm

Dokumenty

O-342

Cell line · Číslo výrobku 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

€800.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka O-342 pochádza z nádoru vaječníkov potkanov a je široko používaná vo výskume rakoviny, najmä v štúdiách zameraných na rakovinu vaječníkov a rezistenciu voči chemoterapii. Táto bunka sa vyznačuje schopnosťou rásť v monovrstve a vstúpiť do log-fázy rastu približne 24 hodín po zasiatí, pričom čas zdvojnásobenia buniek je približne 24 hodín. Bunka O-342 slúži ako rodičovská línia pre niekoľko podlín, vrátane podlínie O-342/DDP rezistentnej na cisplatinu, ktorá bola vyvinutá postupným zvyšovaním koncentrácií cisplatiny in vitro.

Bunky O-342 vykazujú heteroploidiu vo svojej chromozómovej štruktúre, čo kontrastuje s takmer diploidným karyotypom pozorovaným v sublínii O-342/DDP. Táto karyotypová zmena svedčí o selektívnom tlaku vyvíjanom nepretržitou expozíciou cisplatine, ktorá eliminuje subpopuláciu citlivú na cisplatinu, čo vedie k prevládaniu rezistentných buniek. Biochemické analýzy ukázali, že bunky O-342/DDP majú 33-násobne vyššiu rezistenciu voči cisplatine v porovnaní s rodičovskými bunkami O-342. Táto rezistencia sa odráža v hodnotách ID50, pričom bunky O-342/DDP majú ID50 33 μM v porovnaní s 1 μM v bunkách O-342.

Ďalšie štúdie odhalili, že bunky O-342/DDP majú výrazne vyššie hladiny intracelulárneho celkového glutatiónu (GSH+GSSG) na úrovni 3,04 nmol/106 buniek v porovnaní s 1,37 nmol/106 buniek v bunkách O-342. Zvýšené hladiny glutatiónu sú spojené so zvýšenou schopnosťou detoxikácie, čo prispieva k chemickej rezistencii pozorovanej v bunkách O-342/DDP. Okrem toho, po liečbe cisplatinou sú medzivláknové krížové väzby DNA a zlomy jednovláknových reťazcov výrazne vyššie v rodičovských bunkách O-342 ako v rezistentných bunkách O-342/DDP, čo naznačuje zvýšenú schopnosť opravy DNA v rezistentnej sublínii.

Celkovo bunka O-342 spolu so svojou cisplatinou rezistentnou podlinkou O-342/DDP poskytuje robustný model na skúmanie mechanizmov chemickej rezistencie pri rakovine vaječníkov. Tieto bunky sú neoceniteľné pre identifikáciu potenciálnych terapeutických cieľov a vývoj stratégií na prekonanie rezistencie voči chemoterapii, čím sa zlepšujú výsledky liečby pacientok s rakovinou vaječníkov.

Tkanivo
Vaječník
Choroba
Adenokarcinóm

02Klasifikácia

Organizmus
Potkan
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citácia
O-342 (katalógové číslo Cytion 500305)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5847

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Plemeno / poddruh
BDIx