İçeriğe atla
O-342
Doku
Yumurtalık
Hastalık
Adenokarsinom

O-342

Cell line · Ürün numarası 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

€800.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

O-342 hücre hattı, sıçan yumurtalık tümöründen elde edilmiştir ve kanser araştırmalarında, özellikle yumurtalık kanseri ve kemoterapi direncine odaklanan çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Bu hücre hattı, tek tabaka halinde büyüme ve tohumlamadan yaklaşık 24 saat sonra log faz büyümesine girme özelliği ile karakterize edilir ve hücre popülasyonunun ikiye katlanma süresi yaklaşık 24 saattir. O-342 hücre hattı, in vitro olarak cisplatin konsantrasyonlarının kademeli olarak artırılmasıyla geliştirilen cisplatin dirençli O-342/DDP alt hattı da dahil olmak üzere birçok alt hattın ana hattı olarak işlev görür.

O-342 hücreleri, O-342/DDP alt hattında gözlenen neredeyse diploid karyotip ile tezat oluşturan kromozomal yapılarında heteroploidi sergilerler. Bu karyotipik değişiklik, sürekli sisplatin maruziyetinin uyguladığı seçici baskıyı gösterir; bu baskı, sisplatine duyarlı alt popülasyonu ortadan kaldırarak dirençli hücrelerin baskın olmasına neden olur. Biyokimyasal analizler, O-342/DDP hücrelerinin, ebeveyn O-342 hücrelerine kıyasla sisplatine karşı 33 kat daha fazla direnç gösterdiğini ortaya koymuştur. Bu direnç, ID50 değerlerine de yansımaktadır; O-342/DDP hücrelerinin ID50 değeri 33 μM iken, O-342 hücrelerinin ID50 değeri 1 μM'dir.

Daha ileri çalışmalar, O-342/DDP hücrelerinin, O-342 hücrelerindeki 1,37 nmol/106 hücreye kıyasla, 3,04 nmol/106 hücre ile önemli ölçüde daha yüksek hücre içi toplam glutatyon (GSH+GSSG) seviyelerine sahip olduğunu ortaya koymuştur. Artan glutatyon seviyeleri, O-342/DDP hücrelerinde gözlenen kemoterapi direncine katkıda bulunan, gelişmiş detoksifikasyon yetenekleri ile ilişkilidir. Ek olarak, sisplatin tedavisinin ardından, DNA interstrand çapraz bağları ve tek iplik kırılmaları, dirençli O-342/DDP hücrelerine kıyasla ebeveyn O-342 hücrelerinde belirgin şekilde daha yüksektir, bu da dirençli alt hattaki DNA onarım kapasitesinin arttığını göstermektedir.

Genel olarak, O-342 hücre hattı, sisplatin dirençli alt hattı O-342/DDP ile birlikte, yumurtalık kanserinde kemoterapi direncinin mekanizmalarını araştırmak için sağlam bir model sunmaktadır. Bu hücre hatları, potansiyel terapötik hedefleri belirlemek ve kemoterapiye direnci aşmak için stratejiler geliştirmek, böylece yumurtalık kanseri hastalarının tedavi sonuçlarını iyileştirmek için çok değerlidir.

Doku
Yumurtalık
Hastalık
Adenokarsinom

02Sınıflandırma

Canlı
Sıçan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
O-342 (Cytion katalog numarası 500305)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10116
Cellosaurus
CVCL_5847

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Tür / alt tür
BDIx