Skip to content
O-342
Tissue
รังไข่
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา

Documents

O-342

Cell line · Product number 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ O-342 มีต้นกำเนิดจากเนื้องอกรังไข่ของหนู และถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยเกี่ยวกับมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในงานวิจัยที่มุ่งเน้นมะเร็งรังไข่และการดื้อยาเคมีบำบัด เซลล์ไลน์นี้มีลักษณะเด่นคือสามารถเจริญเติบโตเป็นชั้นเดียวและเข้าสู่ระยะการเจริญเติบโตแบบลอการิทึม (log-phase) ประมาณ 24 ชั่วโมงหลังจากการเพาะปลูก โดยมีเวลาในการเพิ่มจำนวนเซลล์เป็นสองเท่าประมาณ 24 ชั่วโมง เซลล์ไลน์ O-342 ทำหน้าที่เป็นเซลล์ไลน์ต้นกำเนิดสำหรับเซลล์ไลน์ย่อยหลายสาย รวมถึงเซลล์ไลน์ย่อย O-342/DDP ที่ดื้อต่อยาซิสพลาติน ซึ่งถูกพัฒนาขึ้นโดยการเพิ่มปริมาณยาซิสพลาตินเป็นขั้นตอนในหลอดทดลอง

เซลล์ O-342 แสดงลักษณะเฮเทอโรพลอยดีในโครงสร้างโครโมโซม ซึ่งแตกต่างจากคาริโอไทป์ที่เกือบเป็นไดพลอยด์ที่พบในสายย่อย O-342/DDP การเปลี่ยนแปลงของคาริโอไทป์นี้บ่งชี้ถึงแรงกดดันจากการคัดเลือกที่เกิดจากการสัมผัสกับซิสพลาตินอย่างต่อเนื่อง ซึ่งกำจัดประชากรย่อยที่ไวต่อซิสพลาตินออกไป ส่งผลให้เซลล์ที่ดื้อต่อยาเป็นส่วนใหญ่ การวิเคราะห์ทางชีวเคมีแสดงให้เห็นว่าเซลล์ O-342/DDP มีความต้านทานต่อซิสพลาตินเพิ่มขึ้น 33 เท่าเมื่อเทียบกับเซลล์ต้นกำเนิด O-342 ความต้านทานนี้สะท้อนให้เห็นในค่า ID50 โดยเซลล์ O-342/DDP มีค่า ID50 ที่ 33 μM เมื่อเทียบกับ 1 μM ในเซลล์ O-342

การศึกษาเพิ่มเติมได้เปิดเผยว่า เซลล์ O-342/DDP มีระดับของกลูตาไธโอนรวมภายในเซลล์ (GSH+GSSG) สูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญที่ 3.04 นาโนโมล/106 เซลล์ เมื่อเทียบกับ 1.37 นาโนโมล/106 เซลล์ ในเซลล์ O-342 ระดับกลูตาไธโอนที่เพิ่มขึ้นมีความสัมพันธ์กับความสามารถในการขจัดสารพิษที่ดีขึ้น ซึ่งส่งผลให้เกิดความต้านทานต่อเคมีบำบัดที่พบในเซลล์ O-342/DDP นอกจากนี้ หลังการรักษาด้วยซิสพลาติน พบว่าความเชื่อมโยงระหว่างสายดีเอ็นเอและการขาดสายเดี่ยวในดีเอ็นเอของเซลล์ O-342 ต้นกำเนิดสูงกว่าเซลล์ O-342/DDP ที่ดื้อยาอย่างมีนัยสำคัญ แสดงให้เห็นถึงความสามารถในการซ่อมแซมดีเอ็นเอที่เพิ่มขึ้นในกลุ่มเซลล์ย่อยที่ดื้อยา

โดยรวมแล้ว สายเซลล์ O-342 รวมถึงสายย่อยที่ดื้อต่อยาซิสพลาติน O-342/DDP เป็นแบบจำลองที่แข็งแกร่งสำหรับการศึกษาเชิงกลไกของความดื้อต่อเคมีบำบัดในมะเร็งรังไข่ สายเซลล์เหล่านี้มีคุณค่าอย่างยิ่งในการระบุเป้าหมายการรักษาที่เป็นไปได้และพัฒนากลยุทธ์เพื่อเอาชนะความดื้อต่อเคมีบำบัด ซึ่งจะช่วยปรับปรุงผลลัพธ์การรักษาสำหรับผู้ป่วยมะเร็งรังไข่

Tissue
รังไข่
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา

02Classification

Organism
Rat
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
O-342 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 500305)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_5847

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
บีดีไอเอ็กซ์