Skip to content
O-342
Tissue
שחלה
Disease
אדנוקרצינומה

Documents

O-342

Cell line · Product number 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

קו התאים O-342 נגזר מגידול בשחלה של חולדה ומשמש רבות במחקר הסרטן, במיוחד במחקרים המתמקדים בסרטן השחלה ועמידות לכימותרפיה. קו תאים זה מאופיין ביכולתו לגדול בשכבה אחת ולהיכנס לשלב צמיחה לוגי כ-24 שעות לאחר הזריעה, עם זמן הכפלת אוכלוסיית התאים של כ-24 שעות. קו התאים O-342 משמש כקו הורי למספר תת-קווים, כולל תת-הקו O-342/DDP העמיד לציספלטין, אשר פותח באמצעות העלאה הדרגתית של ריכוזי הציספלטין במבחנה.

תאי O-342 מציגים הטרופלואידיות במבנה הכרומוזומלי שלהם, בניגוד לקריוטיפ כמעט דיפלואידי שנצפה בקו המשנה O-342/DDP. שינוי קריוטיפי זה מעיד על הלחץ הסלקטיבי המופעל על ידי חשיפה מתמשכת לציספלטין, המחסל את תת-האוכלוסייה הרגישה לציספלטין, וכתוצאה מכך נוצרת דומיננטיות של תאים עמידים. ניתוחים ביוכימיים הראו שתאי O-342/DDP בעלי עמידות גבוהה פי 33 לציספלטין בהשוואה לתאי O-342 ההוריים. עמידות זו באה לידי ביטוי בערכי ID50, כאשר לתאי O-342/DDP ערך ID50 של 33 μM בהשוואה ל-1 μM בתאי O-342.

מחקרים נוספים גילו כי לתאי O-342/DDP רמות גבוהות משמעותית של גלוטתיון תאי (GSH+GSSG) ב-3.04 nmol/106 תאים, בהשוואה ל-1.37 nmol/106 תאים בתאי O-342. רמות הגלוטתיון המוגברות קשורות ליכולות ניקוי רעלים משופרות, התורמות לעמידות הכימית שנצפתה בתאי O-342/DDP. בנוסף, לאחר טיפול בציספלטין, קישורים בין-גדיליים ב-DNA ושבירות גדיל בודד גבוהים באופן ניכר בתאי O-342 ההוריים בהשוואה לתאי O-342/DDP העמידים, מה שמעיד על יכולת תיקון DNA מוגברת בתת-קו העמיד.

בסך הכל, קו התאים O-342, יחד עם תת-הקו העמיד לציספלטין O-342/DDP, מספק מודל חזק לחקר מנגנוני העמידות לכימותרפיה בסרטן השחלות. קווי תאים אלה הם בעלי ערך רב לזיהוי מטרות טיפוליות פוטנציאליות ולפיתוח אסטרטגיות להתגברות על עמידות לכימותרפיה, ובכך לשיפור תוצאות הטיפול בחולות סרטן השחלות.

Tissue
שחלה
Disease
אדנוקרצינומה

02Classification

Organism
Rat
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל

04Identifiers

Citation
O-342 (מספר קטלוגי Cytion 500305)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_5847

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Breed / subspecies
BDIx