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O-342
ティッシュ
卵巣
病気
腺癌

O-342

Cell line · 製品番号 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

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ロット
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01概要

説明

O-342細胞株はラット卵巣腫瘍由来であり、がん研究、特に卵巣癌と化学療法耐性に関する研究で広く利用されている。この細胞株は単層培養が可能で、播種後約24時間で対数増殖期に入り、細胞集団の倍加時間は約24時間である。 O-342細胞株は、いくつかの亜株の親株として機能しており、その中には、in vitroでシスプラチン濃度を段階的に増加させることで開発されたシスプラチン耐性O-342/DDP亜株も含まれる。

O-342細胞は染色体構造において異数性を示すが、これはO-342/DDP亜株で観察されるほぼ二倍体の核型とは対照的である。この核型変化は、シスプラチン感受性亜集団を排除し耐性細胞の優位をもたらす、持続的なシスプラチン曝露による選択圧を示唆している。 生化学的解析により、O-342/DDP細胞は親株O-342細胞と比較してシスプラチン耐性が33倍増加していることが示された。この耐性はID50値に反映され、O-342/DDP細胞のID50は33μMであるのに対し、O-342細胞では1μMであった。

さらなる研究により、O-342/DDP細胞は細胞内総グルタチオン(GSH+GSSG)レベルが3.04 nmol/10⁶細胞と、O-342細胞の1.37 nmol/10⁶細胞に比べて有意に高いことが明らかになった。 グルタチオン濃度の上昇は解毒能の増強と関連し、O-342/DDP細胞で観察される化学療法抵抗性に寄与している。さらにシスプラチン処理後、DNA鎖間架橋および一本鎖切断は親株O-342細胞において耐性株O-342/DDP細胞よりも著しく高く、耐性亜株におけるDNA修復能の増強を示唆している。

総じて、O-342細胞株とそのシスプラチン耐性亜株O-342/DDPは、卵巣癌における化学療法耐性のメカニズムを調査するための強力なモデルを提供する。これらの細胞株は、潜在的な治療標的を特定し、化学療法耐性を克服する戦略を開発する上で極めて有用であり、それによって卵巣癌患者の治療成績を改善することが期待される。

ティッシュ
卵巣
病気
腺癌

02分類

生物
ネズミ
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様

04識別子

引用
O-342(Cytion カタログ番号 500305)
NCBI 納税者番号
10116
セロサウルス
CVCL_5847

05取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

品種/亜種
BDIx