Siirry sisältöön
O-342
Kudos
Munasarja
Sairaus
Adenokarsinooma

Asiakirjat

O-342

Cell line · Tuotenumero 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

O-342-solulinja on peräisin rotan munasarjasyövästä, ja sitä käytetään laajalti syöpätutkimuksessa, erityisesti munasarjasyöpää ja kemoterapian vastustuskykyä koskevissa tutkimuksissa. Tälle solulinjalle on ominaista sen kyky kasvaa yksikerroksisena ja siirtyä log-vaiheen kasvuun noin 24 tuntia kylvämisen jälkeen, jolloin solupopulaation kaksinkertaistumisaika on noin 24 tuntia. O-342-solulinja toimii useiden alalinjojen emolinjana, mukaan lukien sisplatiiniresistentti O-342/DDP-alalinja, joka kehitettiin lisäämällä sisplatiinipitoisuutta vaiheittain in vitro.

O-342-soluilla on heteroploidi kromosomirakenteessa, mikä eroaa O-342/DDP-alalinjassa havaitusta lähes diploidisesta karyotyypistä. Tämä karyotyyppinen muutos viittaa jatkuvan sisplatiinialtistuksen aiheuttamaan selektiiviseen paineeseen, joka eliminoi sisplatiinille herkän alipopulaation, jolloin resistentit solut jäävät hallitseviksi. Biokemialliset analyysit ovat osoittaneet, että O-342/DDP-soluilla on 33-kertainen resistenssi sisplatiinille verrattuna emosoluihin O-342. Tämä resistenssi näkyy ID50-arvoissa, joissa O-342/DDP-solujen ID50 on 33 μM verrattuna O-342-solujen 1 μM:iin.

Lisätutkimukset ovat paljastaneet, että O-342/DDP-soluilla on huomattavasti korkeammat solunsisäisen kokonaisglutationin (GSH+GSSG) pitoisuudet, 3,04 nmol/106 solua, verrattuna O-342-solujen 1,37 nmol/106 soluun. Glutationin pitoisuuden nousu liittyy parantuneeseen detoksifikaatiokykyyn, mikä vaikuttaa O-342/DDP-soluissa havaittuun kemoresistenssiin. Lisäksi sisplatiinihoidon jälkeen DNA:n säikeiden väliset ristisidokset ja yksisäikeiset katkokset ovat huomattavasti suurempia emosoluissa O-342 kuin resistenteissä O-342/DDP-soluissa, mikä viittaa resistentin alalinjan parantuneeseen DNA:n korjauskykyyn.

Kaiken kaikkiaan O-342-solulinja yhdessä sisplatiiniresistentin O-342/DDP-alalinjansa kanssa tarjoaa vankan mallin munasarjasyövän kemoresistenssin mekanismien tutkimiseen. Nämä solulinjat ovat korvaamattomia potentiaalisten terapeuttisten kohteiden tunnistamisessa ja kemoterapian resistenssin voittamiseen tähtäävien strategioiden kehittämisessä, mikä parantaa munasarjasyöpäpotilaiden hoitotuloksia.

Kudos
Munasarja
Sairaus
Adenokarsinooma

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
O-342 (Cytionin luettelonumero 500305)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_5847

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Rotua / alalajia
BDIx