O-342
Cell line · Product number 500305
The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
O-342 細胞系源自大鼠卵巢腫瘤,廣泛應用於癌症研究,特別是在針對卵巢癌及化療抗藥性的研究中。 該細胞系的特徵在於能夠以單層方式生長,並在接種後約 24 小時進入對數生長期,其細胞群倍增時間約為 24 小時。 O-342 細胞系是多個亞系的親本系,包括對順鉑具抗性的 O-342/DDP 亞系,該亞系是透過在體外逐步增加順鉑濃度而開發出來的。
O-342 細胞的染色體結構呈現異倍體特徵,這與 O-342/DDP 亞系中觀察到的近二倍體核型形成對比。 這種核型變化表明,持續接觸順鉑所產生的選擇壓力,消除了對順鉑敏感的亞群,導致耐藥細胞佔主導地位。 生化分析顯示,與親代 O-342 細胞相比,O-342/DDP 細胞對順鉑的耐藥性提高了 33 倍。 這種抗性反映在 ID50 值上,O-342/DDP 細胞的 ID50 為 33 μM,而 O-342 細胞則為 1 μM。
進一步研究顯示,O-342/DDP 細胞的細胞內總谷胱甘肽(GSH+GSSG)水平顯著較高,達 3.04 nmol/10⁶ 細胞,而 O-342 細胞則為 1.37 nmol/10⁶ 細胞。 谷胱甘肽水平的升高與解毒能力的增強有關,這有助於解釋 O-342/DDP 細胞中觀察到的化療抗藥性。 此外,經順鉑處理後,親代 O-342 細胞中的 DNA 鏈間交聯及單鏈斷裂程度,明顯高於耐藥的 O-342/DDP 細胞,這表明該耐藥亞系的 DNA 修復能力有所增強。
總體而言,O-342 細胞系及其順鉑耐藥亞系 O-342/DDP,為探究卵巢癌化療耐藥機制提供了可靠的模型。這些細胞系對於識別潛在的治療靶點,以及開發克服化療耐藥性的策略具有不可或缺的價值,從而能改善卵巢癌患者的治療成效。
- Tissue
- 卵巢
- Disease
- 腺癌
02Classification
- Organism
- Rat
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮樣
04Identifiers
- Citation
- O-342(Cytion 型號 500305)
- NCBI TaxID
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_5847
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM(MEM Eagle),含 2 mM L-谷氨醯胺,含 2.2 g/L NaHCO₃,含 EBSS(Cytion 產品編號 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基,並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS,T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著,用 Accutase 完全覆蓋細胞,T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘,使其脫附。 孵育後,將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮,然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液,將細胞重新懸浮於新鮮培養基中,並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Breed / subspecies
- BDIx
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Disclaimer
- 本產品所提供的細胞僅供體外實驗室研究之用,不得用於臨床或診斷用途,亦不得施予人類或用於獸醫用途。使用者必須遵守所有適用於研究環境中處理及使用這些細胞的相關指引與法規。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)