O-342

O-342-cellelinjen stammer fra en rotte-æggestokkræft og bruges i vid udstrækning i kræftforskning, især i studier med fokus på æggestokkræft og kemoterapi-resistens. Denne cellelinje er kendetegnet ved sin evne til at vokse i et monolag og gå ind i log-fase vækst ca. 24 timer efter såning, med en cellepopulation, der fordobles på ca. 24 timer. O-342-cellelinjen fungerer som forældrelinje for flere underlinjer, herunder den cisplatinresistente O-342/DDP-underlinje, som blev udviklet gennem en trinvis forøgelse af cisplatin-koncentrationerne in vitro.

O-342-celler udviser heteroploiditet i deres kromosomstruktur, hvilket står i kontrast til den næsten diploide karyotype, der observeres i O-342/DDP-underlinjen. Denne karyotypeændring er tegn på det selektive pres, der udøves af kontinuerlig eksponering for cisplatin, som eliminerer den cisplatin-følsomme subpopulation, hvilket resulterer i en overvægt af resistente celler. Biokemiske analyser har vist, at O-342/DDP-cellerne har en 33 gange højere resistens over for cisplatin sammenlignet med de oprindelige O-342-celler. Denne resistens afspejles i ID50-værdierne, hvor O-342/DDP-cellerne har en ID50 på 33 μM sammenlignet med 1 μM i O-342-cellerne.

Yderligere undersøgelser har afsløret, at O-342/DDP-cellerne har signifikant højere niveauer af intracellulært total glutathion (GSH+GSSG) på 3,04 nmol/10⁶ celler sammenlignet med 1,37 nmol/10⁶ celler i O-342-cellerne. De øgede glutathionniveauer er forbundet med forbedrede afgiftningsegenskaber, hvilket bidrager til den kemoresistens, der observeres i O-342/DDP-cellerne. Derudover er DNA-interstrengskrydsbindinger og enkeltstrengsbrud efter cisplatinbehandling markant højere i de oprindelige O-342-celler end i de resistente O-342/DDP-celler, hvilket indikerer en øget DNA-reparationskapacitet i den resistente sublinje.

Samlet set udgør O-342-cellelinjen sammen med dens cisplatinresistente sublinje O-342/DDP en robust model til undersøgelse af mekanismerne bag kemoresistens i æggestokkræft. Disse cellelinjer er uvurderlige for identificering af potentielle terapeutiske mål og udvikling af strategier til at overvinde resistens over for kemoterapi, hvorved behandlingsresultaterne for patienter med æggestokkræft forbedres.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring