Přejít na obsah
O-342
Tkáň
Ovarium
Nemoc
Adenokarcinom

Dokumenty

O-342

Cell line · Číslo výrobku 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie O-342 pochází z nádoru vaječníků potkana a je široce používána ve výzkumu rakoviny, zejména ve studiích zaměřených na rakovinu vaječníků a rezistenci na chemoterapii. Tato buněčná linie se vyznačuje schopností růst v monovrstvě a vstoupit do logaritmické fáze růstu přibližně 24 hodin po nasazení, přičemž doba zdvojnásobení buněčné populace je přibližně 24 hodin. Buněčná linie O-342 slouží jako rodičovská linie pro několik podliní, včetně podlinie O-342/DDP rezistentní na cisplatinu, která byla vyvinuta postupným zvyšováním koncentrací cisplatiny in vitro.

Buňky O-342 vykazují heteroploidii ve své chromozomální struktuře, což kontrastuje s téměř diploidním karyotypem pozorovaným v sublinii O-342/DDP. Tato karyotypová změna svědčí o selektivním tlaku vyvíjeném nepřetržitou expozicí cisplatinou, která eliminuje subpopulaci citlivou na cisplatinu, což vede k převaze rezistentních buněk. Biochemické analýzy ukázaly, že buňky O-342/DDP mají 33krát vyšší rezistenci na cisplatinu ve srovnání s mateřskými buňkami O-342. Tato rezistence se odráží v hodnotách ID50, přičemž buňky O-342/DDP mají ID50 33 μM ve srovnání s 1 μM u buněk O-342.

Další studie odhalily, že buňky O-342/DDP mají významně vyšší hladiny intracelulárního celkového glutathionu (GSH+GSSG) na úrovni 3,04 nmol/106 buněk, ve srovnání s 1,37 nmol/106 buněk v buňkách O-342. Zvýšené hladiny glutathionu jsou spojeny se zvýšenou schopností detoxikace, což přispívá k chemické rezistenci pozorované v buňkách O-342/DDP. Navíc po léčbě cisplatinou jsou mezipřenosy DNA a zlomy jednovláknové DNA výrazně vyšší v mateřských buňkách O-342 než v rezistentních buňkách O-342/DDP, což naznačuje zvýšenou schopnost opravy DNA v rezistentní sublinii.

Celkově lze říci, že buněčná linie O-342 spolu se svou cisplatinou rezistentní sublinií O-342/DDP poskytuje robustní model pro zkoumání mechanismů chemoresistence u rakoviny vaječníků. Tyto buněčné linie jsou neocenitelné pro identifikaci potenciálních terapeutických cílů a vývoj strategií k překonání rezistence na chemoterapii, čímž se zlepšují výsledky léčby pacientek s rakovinou vaječníků.

Tkáň
Ovarium
Nemoc
Adenokarcinom

02Klasifikace

Organismus
Krysa
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citace
O-342 (katalogové číslo Cytion 500305)
Daňové identifikační číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_5847

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Plemeno / poddruh
BDIx