Μετάβαση στο περιεχόμενο
O-342
Ιστός
Ωοθήκη
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα

Έγγραφα

O-342

Cell line · Αριθμός προϊόντος 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά O-342 προέρχεται από όγκο ωοθηκών αρουραίου και χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο, ιδιαίτερα σε μελέτες που εστιάζουν στον καρκίνο των ωοθηκών και στην αντοχή στη χημειοθεραπεία. Αυτή η κυτταρική σειρά χαρακτηρίζεται από την ικανότητά της να αναπτύσσεται σε μονοστρωματικό στρώμα και να εισέρχεται σε φάση λογαριθμικής ανάπτυξης περίπου 24 ώρες μετά τη σπορά, με χρόνο διπλασιασμού του κυτταρικού πληθυσμού περίπου 24 ώρες. Η κυτταρική σειρά O-342 χρησιμεύει ως γονική σειρά για διάφορες υποσειρές, συμπεριλαμβανομένης της υποσειράς O-342/DDP ανθεκτικής στη σισπλατίνη, η οποία αναπτύχθηκε μέσω της σταδιακής αύξησης των συγκεντρώσεων σισπλατίνης in vitro.

Τα κύτταρα O-342 εμφανίζουν ετεροπλοειδία στη χρωμοσωμική τους δομή, η οποία έρχεται σε αντίθεση με τον σχεδόν διπλοειδή καρυότυπο που παρατηρείται στην υπογραμμή O-342/DDP. Αυτή η καρυοτυπική αλλαγή είναι ενδεικτική της επιλεκτικής πίεσης που ασκείται από τη συνεχή έκθεση στη σισπλατίνη, η οποία εξαλείφει τον ευαίσθητο στη σισπλατίνη υποπληθυσμό, με αποτέλεσμα την κυριαρχία των ανθεκτικών κυττάρων. Βιοχημικές αναλύσεις έχουν δείξει ότι τα κύτταρα O-342/DDP παρουσιάζουν 33-πλάσια αύξηση της ανθεκτικότητας στη σισπλατίνη σε σύγκριση με τα γονικά κύτταρα O-342. Αυτή η ανθεκτικότητα αντικατοπτρίζεται στις τιμές ID50, με τα κύτταρα O-342/DDP να έχουν ID50 33 μM σε σύγκριση με 1 μM στα κύτταρα O-342.

Περαιτέρω μελέτες έχουν αποκαλύψει ότι τα κύτταρα O-342/DDP έχουν σημαντικά υψηλότερα επίπεδα ενδοκυτταρικής ολικής γλουταθειόνης (GSH+GSSG) στα 3,04 nmol/106 κύτταρα, σε σύγκριση με 1,37 nmol/106 κύτταρα στα κύτταρα O-342. Τα αυξημένα επίπεδα γλουταθειόνης σχετίζονται με ενισχυμένες ικανότητες αποτοξίνωσης, συμβάλλοντας στην χημειοαντοχή που παρατηρείται στα κύτταρα O-342/DDP. Επιπλέον, μετά από θεραπεία με σισπλατίνη, οι διασταυρώσεις μεταξύ των κλώνων DNA και οι θραύσεις μονόκλωνου DNA είναι σημαντικά υψηλότερες στα γονικά κύτταρα O-342 σε σύγκριση με τα ανθεκτικά κύτταρα O-342/DDP, υποδηλώνοντας αυξημένη ικανότητα επιδιόρθωσης του DNA στην ανθεκτική υπογραμμή.

Συνολικά, η κυτταρική σειρά O-342, μαζί με την ανθεκτική στη σισπλατίνη υποσειρά O-342/DDP, παρέχει ένα ισχυρό μοντέλο για τη διερεύνηση των μηχανισμών χημειοανθεκτικότητας στον καρκίνο των ωοθηκών. Αυτές οι κυτταρικές σειρές είναι ανεκτίμητες για τον εντοπισμό πιθανών θεραπευτικών στόχων και την ανάπτυξη στρατηγικών για την υπέρβαση της ανθεκτικότητας στη χημειοθεραπεία, βελτιώνοντας έτσι τα αποτελέσματα της θεραπείας για τις ασθενείς με καρκίνο των ωοθηκών.

Ιστός
Ωοθήκη
Ασθένεια
Αδενοκαρκίνωμα

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Αρουραίος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
O-342 (αριθμός καταλόγου Cytion 500305)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10116
Κελλοσαύρος
CVCL_5847

05Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-γλουταμίνη, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (αριθμός άρθρου Cytion 820100a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS και 1% NEAA
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

07Δωρητής

Φυλή / υποείδος
BDIx