Премини към съдържанието
O-342
Тъкан
Яйчник
Заболяване
Аденокарцином

Документи

O-342

Cell line · Номер на продукта 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

€800.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия O-342 е получена от тумор на яйчниците на плъх и се използва широко в изследванията на рака, особено в проучвания, фокусирани върху рака на яйчниците и резистентността към химиотерапия. Тази клетъчна линия се характеризира със способността си да расте в монослой и да навлезе в логаритмична фаза на растеж приблизително 24 часа след засяването, с време за удвояване на клетъчната популация от около 24 часа. Клетъчната линия O-342 служи като родителска линия за няколко подлинии, включително подлинията O-342/DDP, резистентна към цисплатин, която е разработена чрез постепенно увеличаване на концентрациите на цисплатин in vitro.

Клетките O-342 проявяват хетероплоидия в хромозомната си структура, което контрастира с почти диплоидния кариотип, наблюдаван в подлинията O-342/DDP. Тази кариотипна промяна е показателна за селективния натиск, упражняван от продължителното излагане на цисплатин, което елиминира субпопулацията, чувствителна към цисплатин, което води до преобладаване на резистентните клетки. Биохимичните анализи показват, че O-342/DDP клетките притежават 33-кратно увеличение на резистентността към цисплатин в сравнение с родителските O-342 клетки. Тази резистентност се отразява в ID50 стойностите, като O-342/DDP клетките имат ID50 от 33 μM в сравнение с 1 μM в O-342 клетките.

Допълнителни проучвания са показали, че O-342/DDP клетките имат значително по-високи нива на интрацелуларен общ глутатион (GSH+GSSG) от 3,04 nmol/106 клетки, в сравнение с 1,37 nmol/106 клетки в O-342 клетките. Повишените нива на глутатион са свързани с подобрени детоксикационни способности, което допринася за химиорезистентността, наблюдавана в O-342/DDP клетките. Освен това, след лечение с цисплатин, междуверижните кръстосани връзки на ДНК и едноверижните разкъсвания са значително по-високи в родителските O-342 клетки, отколкото в резистентните O-342/DDP клетки, което показва повишена способност за репарация на ДНК в резистентната подлиния.

Като цяло, клетъчната линия O-342, заедно с нейната резистентна към цисплатин подлиния O-342/DDP, предоставя надежден модел за изследване на механизмите на химиорезистентност при рак на яйчниците. Тези клетъчни линии са безценни за идентифициране на потенциални терапевтични цели и разработване на стратегии за преодоляване на резистентността към химиотерапия, като по този начин подобряват резултатите от лечението на пациенти с рак на яйчниците.

Тъкан
Яйчник
Заболяване
Аденокарцином

02Класификация

Организъм
Плъх
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител

04Идентификатори

Източник
O-342 (каталожен номер 500305 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10116
Целозавър
CVCL_5847

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (номер на статията в Cytion 820100a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS и 1% NEAA
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Порода / подвид
BDIx