Pereiti prie turinio
O-342
Audinys
Kiaušidės
Liga
Adenokarcinoma

Dokumentai

O-342

Cell line · Prekės numeris 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

O-342 ląstelių linija yra kilusi iš žiurkių kiaušidžių naviko ir plačiai naudojama vėžio tyrimuose, ypač tyrimuose, susijusiuose su kiaušidžių vėžiu ir atsparumu chemoterapijai. Ši ląstelių linija pasižymi gebėjimu augti monosluoksniu ir maždaug po 24 valandų nuo pasėjimo pereiti į logaritminę augimo fazę, o ląstelių populiacijos padvigubėjimo laikas yra apie 24 valandos. O-342 ląstelių linija yra kelių sublinijų, įskaitant cisplatino atsparią O-342/DDP subliniją, kuri buvo sukurta laipsniškai didinant cisplatino koncentraciją in vitro, tėvinė linija.

O-342 ląstelės pasižymi heteroploidija chromosomų struktūroje, o tai kontrastuoja su beveik diploidiniu kariotipu, stebimu O-342/DDP sublinijoje. Šis kariotipinis pokytis rodo selektyvų spaudimą, kurį daro nuolatinis cisplatino poveikis, kuris eliminuoja cisplatinui jautrią subpopuliaciją, dėl ko dominuoja atsparios ląstelės. Biocheminiai tyrimai parodė, kad O-342/DDP ląstelės yra 33 kartus atsparesnės cisplatinui nei pirminės O-342 ląstelės. Šis atsparumas atsispindi ID50 vertėse: O-342/DDP ląstelių ID50 yra 33 μM, palyginti su 1 μM O-342 ląstelėse.

Tolesni tyrimai parodė, kad O-342/DDP ląstelės turi žymiai didesnį ląstelių vidaus bendrą glutationo (GSH+GSSG) kiekį – 3,04 nmol/106 ląstelių, palyginti su 1,37 nmol/106 ląstelių O-342 ląstelėse. Padidėjęs glutationo kiekis yra susijęs su sustiprintais detoksikacijos gebėjimais, prisidedančiais prie O-342/DDP ląstelėse stebimo atsparumo chemoterapijai. Be to, po cisplatino gydymo DNR grandžių tarpusavio jungtys ir viengubos grandinės lūžiai yra žymiai didesni tėviniuose O-342 ląstelėse nei atspariose O-342/DDP ląstelėse, o tai rodo padidėjusį DNR remonto gebėjimą atsparioje sublinijoje.

Apskritai, O-342 ląstelių linija kartu su cisplatino atsparia sublinija O-342/DDP yra patikimas modelis kiaušidžių vėžio chemoresistentiškumo mechanizmų tyrimams. Šios ląstelių linijos yra neįkainojamos nustatant potencialius terapinius tikslus ir kuriant strategijas chemoterapijos atsparumui įveikti, taip gerinant kiaušidžių vėžio pacientų gydymo rezultatus.

Audinys
Kiaušidės
Liga
Adenokarcinoma

02Klasifikacija

Organizmas
Žiurkė
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus

04Identifikatoriai

Nuoroda
O-342 (Cytion katalogo numeris 500305)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10116
Cellosaurus
CVCL_5847

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
BDIx