O-342

A linhagem celular O-342 é derivada de um tumor ovariano de rato e é amplamente utilizada na pesquisa sobre o câncer, particularmente em estudos voltados para o câncer de ovário e a resistência à quimioterapia. Essa linha celular é caracterizada por sua capacidade de crescer em monocamada e entrar na fase logarítmica de crescimento aproximadamente 24 horas após a semeadura, com um tempo de duplicação da população celular de cerca de 24 horas. A linhagem celular O-342 serve como linhagem parental para várias sublinhagens, incluindo a sublinhagem O-342/DDP resistente à cisplatina, que foi desenvolvida por meio do aumento gradual das concentrações de cisplatina in vitro.

As células O-342 apresentam heteroploidia em sua estrutura cromossômica, o que contrasta com o cariótipo quase diploide observado na sublinha O-342/DDP. Essa alteração cariotípica é indicativa da pressão seletiva exercida pela exposição contínua à cisplatina, que elimina a subpopulação sensível à cisplatina, resultando na predominância de células resistentes. Análises bioquímicas demonstraram que as células O-342/DDP apresentam um aumento de 33 vezes na resistência à cisplatina em comparação com as células O-342 parentais. Essa resistência se reflete nos valores de ID50, com as células O-342/DDP apresentando um ID50 de 33 μM, em comparação com 1 μM nas células O-342.

Estudos adicionais revelaram que as células O-342/DDP apresentam níveis significativamente mais elevados de glutationa total intracelular (GSH+GSSG), de 3,04 nmol/10⁶ células, em comparação com 1,37 nmol/10⁶ células nas células O-342. Os níveis elevados de glutationa estão associados a uma maior capacidade de desintoxicação, contribuindo para a quimiorresistência observada nas células O-342/DDP. Além disso, após o tratamento com cisplatina, as ligações cruzadas entre as fitas de DNA e as quebras de fita única são marcadamente mais elevadas nas células O-342 parentais do que nas células O-342/DDP resistentes, indicando uma maior capacidade de reparo do DNA na sublinha resistente.

De modo geral, a linhagem celular O-342, juntamente com sua sublinhagem resistente à cisplatina O-342/DDP, oferece um modelo robusto para investigar os mecanismos de quimiorresistência no câncer de ovário. Essas linhagens celulares são inestimáveis para identificar alvos terapêuticos potenciais e desenvolver estratégias para superar a resistência à quimioterapia, melhorando assim os resultados do tratamento para pacientes com câncer de ovário.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.