Gå direkt till innehållet
O-342
Vävnad
Äggstock
Sjukdom
Adenocarcinom

O-342

Cell line · Produktnummer 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

€800.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen O-342 härstammar från en äggstockscancer hos råtta och används ofta inom cancerforskning, särskilt i studier som fokuserar på äggstockscancer och kemoterapiresistens. Denna cellinje kännetecknas av sin förmåga att växa i ett monolager och gå in i logfasen ungefär 24 timmar efter sådd, med en cellpopulation som fördubblas på cirka 24 timmar. Cellinjen O-342 fungerar som föräldralinje för flera underlinjer, inklusive den cisplatinresistenta underlinjen O-342/DDP, som utvecklades genom stegvis ökning av cisplatin-koncentrationer in vitro.

O-342-celler uppvisar heteroploidi i sin kromosomstruktur, vilket står i kontrast till den nästan diploida karyotypen som observerats i sublinjen O-342/DDP. Denna karyotypiska förändring är ett tecken på det selektiva tryck som utövas av kontinuerlig cisplatinexponering, vilket eliminerar den cisplatin-känsliga subpopulationen, vilket resulterar i en dominans av resistenta celler. Biokemiska analyser har visat att O-342/DDP-cellerna har en 33-faldig ökning av resistensen mot cisplatin jämfört med de ursprungliga O-342-cellerna. Denna resistens återspeglas i ID50-värdena, där O-342/DDP-cellerna har ett ID50-värde på 33 μM jämfört med 1 μM i O-342-cellerna.

Ytterligare studier har visat att O-342/DDP-cellerna har signifikant högre nivåer av intracellulärt totalt glutation (GSH+GSSG) på 3,04 nmol/106 celler, jämfört med 1,37 nmol/106 celler i O-342-cellerna. De ökade glutationnivåerna är förknippade med förbättrad avgiftningsförmåga, vilket bidrar till den kemoresistens som observerats i O-342/DDP-cellerna. Dessutom är DNA-tvärbindningar och enkelsträngsbrott efter cisplatinbehandling markant högre i de parentala O-342-cellerna än i de resistenta O-342/DDP-cellerna, vilket indikerar en ökad DNA-reparationsförmåga i den resistenta sublinjen.

Sammantaget utgör O-342-cellinjen, tillsammans med dess cisplatinresistenta sublinje O-342/DDP, en robust modell för att undersöka mekanismerna bakom kemoresistens vid äggstockscancer. Dessa cellinjer är ovärderliga för att identifiera potentiella terapeutiska mål och utveckla strategier för att övervinna resistens mot kemoterapi, vilket förbättrar behandlingsresultaten för patienter med äggstockscancer.

Vävnad
Äggstock
Sjukdom
Adenocarcinom

02Klassificering

Organism
Råtta
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande

04Identifierare

Källa
O-342 (Cytion katalognummer 500305)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_5847

05Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Ras / underart
BDIx