O-342

Linia komórkowa O-342 pochodzi z guza jajnika szczura i jest szeroko stosowana w badaniach nad rakiem, szczególnie w badaniach dotyczących raka jajnika i oporności na chemioterapię. Linia ta charakteryzuje się zdolnością do wzrostu w monowarstwie i wejścia w fazę logarytmiczną około 24 godziny po wysianiu, przy czym czas podwojenia populacji komórek wynosi około 24 godziny. Linia komórkowa O-342 służy jako linia macierzysta dla kilku podlinii, w tym podlinii O-342/DDP opornej na cisplatynę, która została opracowana poprzez stopniowe zwiększanie stężenia cisplatyny in vitro.

Komórki O-342 wykazują heteroploidalność w swojej strukturze chromosomowej, co kontrastuje z kariotypem zbliżonym do diploidalnego obserwowanym w podlinii O-342/DDP. Ta zmiana kariotypowa wskazuje na presję selekcyjną wywieraną przez ciągłą ekspozycję na cisplatynę, która eliminuje subpopulację wrażliwą na cisplatynę, powodując dominację komórek opornych. Analizy biochemiczne wykazały, że komórki O-342/DDP wykazują 33-krotny wzrost oporności na cisplatynę w porównaniu z komórkami macierzystymi O-342. Oporność ta znajduje odzwierciedlenie w wartościach ID50, gdzie komórki O-342/DDP mają ID50 wynoszące 33 μM w porównaniu z 1 μM w komórkach O-342.

Dalsze badania wykazały, że komórki O-342/DDP mają znacznie wyższy poziom całkowitego glutationu wewnątrzkomórkowego (GSH+GSSG) wynoszący 3,04 nmol/10⁶ komórek w porównaniu z 1,37 nmol/10⁶ komórek w komórkach O-342. Zwiększony poziom glutationu wiąże się z lepszymi zdolnościami detoksykacyjnymi, co przyczynia się do chemoodporności obserwowanej w komórkach O-342/DDP. Ponadto po leczeniu cisplatyną, międzyłańcuchowe wiązania krzyżowe DNA i pęknięcia pojedynczej nici są znacznie wyższe w komórkach macierzystych O-342 niż w opornych komórkach O-342/DDP, co wskazuje na zwiększoną zdolność naprawy DNA w opornej podlinii.

Ogólnie rzecz biorąc, linia komórkowa O-342 wraz z jej oporną na cisplatynę podlinią O-342/DDP stanowi solidny model do badania mechanizmów oporności na chemioterapię w raku jajnika. Linie te są nieocenione w identyfikacji potencjalnych celów terapeutycznych i opracowywaniu strategii przezwyciężania oporności na chemioterapię, poprawiając w ten sposób wyniki leczenia pacjentek z rakiem jajnika.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym