Перейти до вмісту
O-342
Тканина
Яєчник
Хвороба
Аденокарцинома

Документи

O-342

Cell line · Номер товару 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

€800.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія O-342 походить від пухлини яєчників щура і широко використовується в дослідженнях раку, зокрема в дослідженнях, присвячених раку яєчників і резистентності до хіміотерапії. Ця клітинна лінія характеризується здатністю рости в моношарі і входити в логарифмічну фазу росту приблизно через 24 години після посіву, при цьому час подвоєння клітинної популяції становить близько 24 годин. Клітинна лінія O-342 служить батьківською лінією для декількох субліній, включаючи сублінію O-342/DDP, стійку до цисплатину, яка була розроблена шляхом поступового збільшення концентрації цисплатину in vitro.

Клітини O-342 виявляють гетероплоїдію в своїй хромосомній структурі, що контрастує з майже диплоїдним каріотипом, який спостерігається в сублінії O-342/DDP. Ця каріотипічна зміна свідчить про селективний тиск, що чиниться постійним впливом цисплатину, який елімінує чутливу до цисплатину субпопуляцію, що призводить до переважання резистентних клітин. Біохімічні аналізи показали, що клітини O-342/DDP мають у 33 рази вищу резистентність до цисплатину порівняно з батьківськими клітинами O-342. Ця резистентність відображається у значеннях ID50: клітини O-342/DDP мають ID50 33 мкМ порівняно з 1 мкМ у клітинах O-342.

Подальші дослідження показали, що клітини O-342/DDP мають значно вищий рівень внутрішньоклітинного загального глутатіону (GSH+GSSG) — 3,04 нмоль/106 клітин, порівняно з 1,37 нмоль/106 клітин у клітинах O-342. Підвищений рівень глутатіону пов'язаний з посиленими детоксикаційними можливостями, що сприяє хіміорезистентності, яка спостерігається в клітинах O-342/DDP. Крім того, після лікування цисплатином міжланцюгові зшивання ДНК і розриви одноланцюгової ДНК значно вищі в батьківських клітинах O-342, ніж у резистентних клітинах O-342/DDP, що вказує на підвищену здатність до репарації ДНК у резистентній сублінії.

В цілому, клітинна лінія O-342 разом із її резистентною до цисплатину сублінією O-342/DDP є надійною моделлю для дослідження механізмів хіміорезистентності при раку яєчників. Ці клітинні лінії мають неоціненне значення для виявлення потенційних терапевтичних мішеней та розробки стратегій подолання резистентності до хіміотерапії, що дозволяє поліпшити результати лікування пацієнтів з раком яєчників.

Тканина
Яєчник
Хвороба
Аденокарцинома

02Класифікація

Організм
Щур
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні

04Ідентифікатори

Посилання
O-342 (номер за каталогом Cytion 500305)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10116
Целозавр
CVCL_5847

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Порода / підвид
BDIx