Mine otse sisu juurde
O-342
Kude
Munasarjad
Haigus
Adenokartsinoom

Dokumendid

O-342

Cell line · Toote number 500305

The O-342 cell line is derived from a rat ovarian tumor and is widely used in cancer research, particularly in studies focusing on ovarian cancer and chem...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

O-342 rakuliin on saadud rottide munasarjavähist ja seda kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes, eriti munasarjavähi ja kemoteraapia resistentsuse uuringutes. Seda rakuliini iseloomustab võime kasvada ühekihilisena ja jõuda log-faasi kasvu umbes 24 tundi pärast külvamist, kusjuures rakkude populatsiooni kahekordistumisaeg on umbes 24 tundi. O-342 rakuliin on mitme alliliini vanemliin, sealhulgas tsisplatiiniresistentset O-342/DDP alliliini, mis arendati välja tsisplatiini kontsentratsiooni järkjärgulise suurendamise teel in vitro.

O-342 rakkudel esineb kromosoomide struktuuris heteroploidsus, mis on vastandiks O-342/DDP allliinis täheldatud peaaegu diploidsele kariotüübile. See kariotüübi muutus viitab pideva tsisplatiiniga kokkupuute poolt avaldatavale selektiivsele survele, mis kõrvaldab tsisplatiinile tundliku alarühma, mille tulemusena domineerivad resistentsed rakud. Biokeemilised analüüsid on näidanud, et O-342/DDP rakkudel on 33-kordne resistentsus tsisplatiini suhtes võrreldes emarakkudega O-342. See resistentsus peegeldub ID50 väärtustes, kus O-342/DDP rakkudel on ID50 33 μM võrreldes 1 μM-ga O-342 rakkudel.

Edasised uuringud on näidanud, et O-342/DDP rakkudel on oluliselt kõrgem raku sisene glutatiooni (GSH+GSSG) tase, 3,04 nmol/106 rakku, võrreldes 1,37 nmol/106 rakku O-342 rakkudel. Kõrgenenud glutatiooni tase on seotud paranenud detoksikatsioonivõimega, mis aitab kaasa O-342/DDP rakkudes täheldatud kemoresistentsusele. Lisaks on pärast tsisplatiinravi DNA ahelatevahelised ristseosed ja üheahelalised katkestused märkimisväärselt kõrgemad vanemates O-342 rakkudes kui resistentsetes O-342/DDP rakkudes, mis viitab resistentses alaliinis kõrgenenud DNA parandamisvõimele.

Kokkuvõttes pakub O-342 rakuliin koos oma tsisplatiiniresistentsete subliinidega O-342/DDP tugeva mudeli munasarjavähi kemoresistentsuse mehhanismide uurimiseks. Need rakuliinid on hindamatud potentsiaalsete ravi sihtmärkide kindlakstegemisel ja kemoteraapia resistentsuse ületamise strateegiate väljatöötamisel, parandades seeläbi munasarjavähi patsientide ravi tulemusi.

Kude
Munasarjad
Haigus
Adenokartsinoom

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
O-342 (Cytioni katalooginumber 500305)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_5847

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Tõug / alamliik
BDIx