O-342

La lignée cellulaire O-342 est issue d’une tumeur ovarienne de rat et est largement utilisée dans la recherche sur le cancer, en particulier dans les études portant sur le cancer de l’ovaire et la résistance à la chimiothérapie. Cette lignée cellulaire se caractérise par sa capacité à se développer en monocouche et à entrer en phase de croissance logarithmique environ 24 heures après l’ensemencement, avec un temps de doublement de la population cellulaire d’environ 24 heures. La lignée cellulaire O-342 sert de lignée parentale à plusieurs sous-lignées, dont la sous-lignée O-342/DDP résistante au cisplatine, qui a été développée par augmentation progressive des concentrations de cisplatine in vitro.

Les cellules O-342 présentent une hétéroploïdie dans leur structure chromosomique, ce qui contraste avec le caryotype quasi-diploïde observé dans la sous-lignée O-342/DDP. Ce changement karyotypique témoigne de la pression sélective exercée par l’exposition continue au cisplatine, qui élimine la sous-population sensible au cisplatine, entraînant ainsi la prédominance des cellules résistantes. Des analyses biochimiques ont montré que les cellules O-342/DDP présentent une résistance au cisplatine 33 fois supérieure à celle des cellules O-342 parentales. Cette résistance se reflète dans les valeurs d’ID50 : les cellules O-342/DDP présentent une ID50 de 33 μM, contre 1 μM pour les cellules O-342.

Des études complémentaires ont révélé que les cellules O-342/DDP présentent des niveaux significativement plus élevés de glutathion total intracellulaire (GSH + GSSG), soit 3,04 nmol/10⁶ cellules, comparativement à 1,37 nmol/10⁶ cellules chez les cellules O-342. Ces niveaux accrus de glutathion sont associés à des capacités de détoxification renforcées, ce qui contribue à la chimiorésistance observée dans les cellules O-342/DDP. De plus, à la suite d’un traitement au cisplatine, les liaisons croisées entre brins d’ADN et les cassures simple brin sont nettement plus élevées dans les cellules O-342 parentales que dans les cellules O-342/DDP résistantes, ce qui indique une capacité accrue de réparation de l’ADN dans la sous-lignée résistante.

Dans l’ensemble, la lignée cellulaire O-342, ainsi que sa sous-lignée O-342/DDP résistante au cisplatine, constituent un modèle solide pour l’étude des mécanismes de chimiorésistance dans le cancer de l’ovaire. Ces lignées cellulaires sont inestimables pour l’identification de cibles thérapeutiques potentielles et l’élaboration de stratégies visant à surmonter la résistance à la chimiothérapie, améliorant ainsi les résultats thérapeutiques chez les patientes atteintes d’un cancer de l’ovaire.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.