O-342

O-342-cellelinjen stammer fra en eggstokktumor hos rotter og brukes mye i kreftforskning, særlig i studier som fokuserer på eggstokkreft og resistens mot cellegift. Denne cellelinjen er kjennetegnet ved sin evne til å vokse i et monolag og gå inn i log-fase vekst omtrent 24 timer etter såing, med en celledoblingstid på omtrent 24 timer. O-342-cellelinjen fungerer som foreldrelinje for flere underlinjer, inkludert den cisplatinresistente O-342/DDP-underlinjen, som ble utviklet gjennom trinnvis økning av cisplatin-konsentrasjoner in vitro.

O-342-celler viser heteroploiditet i kromosomstrukturen, noe som står i kontrast til den nesten diploide karyotypen som observeres i O-342/DDP-underlinjen. Denne karyotypiske endringen er et tegn på det selektive presset som utøves av kontinuerlig eksponering for cisplatin, som eliminerer den cisplatin-sensitive subpopulasjonen, noe som resulterer i en overvekt av resistente celler. Biokjemiske analyser har vist at O-342/DDP-cellene har en 33 ganger høyere resistens mot cisplatin sammenlignet med de opprinnelige O-342-cellene. Denne resistensen gjenspeiles i ID50-verdiene, hvor O-342/DDP-cellene har en ID50 på 33 μM sammenlignet med 1 μM i O-342-cellene.

Ytterligere studier har vist at O-342/DDP-cellene har betydelig høyere nivåer av intracellulært totalt glutation (GSH+GSSG) på 3,04 nmol/10⁶ celler, sammenlignet med 1,37 nmol/10⁶ celler i O-342-cellene. De økte glutathionnivåene er assosiert med forbedrede avgiftningsegenskaper, noe som bidrar til den kjemoresistensen som observeres i O-342/DDP-cellene. I tillegg er DNA-kryssbindinger mellom strenger og enkeltstrengsbrudd etter cisplatinbehandling markant høyere i de opprinnelige O-342-cellene enn i de resistente O-342/DDP-cellene, noe som indikerer en økt DNA-reparasjonsevne i den resistente sublinjen.

Samlet sett utgjør O-342-cellelinjen, sammen med den cisplatinresistente sublinjen O-342/DDP, en robust modell for å undersøke mekanismene bak kjemoresistens i eggstokkreft. Disse cellelinjene er uvurderlige for å identifisere potensielle terapeutiske mål og utvikle strategier for å overvinne resistens mot kjemoterapi, og dermed forbedre behandlingsresultatene for pasienter med eggstokkreft.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring